Photoaffinity labeling of heme proteins with chemically modified prosthetic groups

• Antragsteller: Professor Dr. Thomas Lindel
• Fachliche Zuordnung: Biochemie
• Förderung: Förderung von 2009 bis 2016
• Projektkennung: Deutsche Forschungsgemeinschaft (DFG) - Projektnummer 100799727

Zur Erforschung der Insertion von Häm- und Molybdän-Kofaktoren in Apoproteine ist es essentiell, neue chemische Werkzeuge zu entwickeln. Von besonderem Interesse werden Diazirin-funktionalisierte Häm-Analoga sein, deren Rekonstitution mit Apoproteinen in enger Kooperation mit der PROTRAIN-Forschergruppe analysiert werden wird. Ein Schlüsselproblem besteht im Einbau von Diazirin-Einheiten in Häm, aber auch in proteinogene Aminosäuren unter minimaler Strukturänderung. Idealerweise wird es möglich, die Rekonstitution von Holoenzymen durch Photolyse und damit einhergehender Freisetzung reaktiver Carbene zu unterbrechen. Die Apoproteine würden gezielt entlang eines Insertionskanals funktionalisiert und durch LTQ-Orbitrap-Massenspektrometrie analysiert. Häm-Derivate werden auch zur Identifizierung von Häm-bindenden Proteinen eingesetzt werden, nach Bindung an fluoreszierende, photoaktivierbare Trägermoleküle. Ebenso erforscht werden wird die Eignung neuartiger fluoreszierender trifunktionaler Linker zur Identifizierung von Protein-Protein-Wechselwirkungen. Auf dem Gebiet der Molybdän- Kofaktoren sollen leistungsfähige Synthesen der Moco-Abbauprodukte „Form A“ und „Form B“ entwickelt werden, um verlässliche Standards zur Bestimmung des Moco-Gehalts eines gegebenen Enzyms bereitzustellen.

• DFG-Verfahren: Forschungsgruppen
• Teilprojekt zu: FOR 1220: Prosthetic groups: transport and insertion - PROTRAIN