Strukturelle und funktionelle Charakterisierung der Oligomerisierungsdomänen und c-terminalen Sequenzen in Mitgliedern der p53 Proteinfamilie

• Antragsteller: Professor Dr. Volker Dötsch
• Fachliche Zuordnung: Strukturbiologie
• Förderung: Förderung von 2005 bis 2010
• Projektkennung: Deutsche Forschungsgemeinschaft (DFG) - Projektnummer 14065087

Das Tumorsuppressorprotein p53 stellt das wichtigste zelluläre Überwachungssystem dar, das die genetische Stabilität einer Zelle sicherstellt. Die kürzlich entdeckten homologen Proteine p63 und p73 hingegen spielen eine entscheidende Rolle in der Entwicklung von Epithelgewebe bzw. in der Entwicklung bestimmter Nervengruppen. Alle drei Proteine besitzen in ihrem C-Terminus sehr wichtige regulatorische Domänen, die einen entscheidenden Einfluss auf die Unterschiede in der biologischen Funktion dieser Proteine haben. In diesem Antrag beschreiben wir eine neue, von uns identifizierte Domäne, die sich im C-Terminus des p53-ähnlichen Proteins aus C. elegans, Cep-1, befindet und die keine signifikante Homologie zu anderen Domänen, inklusive der SAM Domänen aus dem C-Terminus von p63 und p73, aufweist. Wir haben diese Domäne kloniert, expremiert, gereinigt und erste zwei- und dreidimensionale NMR Spektren gemessen. Im Gegensatz zu allen anderen bisher in p53- ähnlichen Proteinen beschriebenen Domänen, liegt diese C-terminale Domäne aus Cep-1 in Lösung als stabiles Dimer vor. Wir wollen die dreidimensionale Struktur dieser Domäne mittels NMR Spektroskopie bestimmen und ihre Bedeutung für die strukturelle Organisation sowie transkriptionelle Aktivität des gesamten Cep-1 Proteins untersuchen. Zusätzlich beschreiben wir Experimente, mit deren Hilfe wir mögliche Wechselwirkungspartner diese neuen Domäne identifizieren wollen. Die Ergebnisse der hier beschriebenen Experimente werden uns neue Einblicke in die Regulation und Funktionsweise von Proteinen der wichtigen p53 Familie vermitteln.

• DFG-Verfahren: Sachbeihilfen