Functions and interactions of the Rad6 pathway in vertebrates
Final Report Abstract
Der Rad6-Weg der DNA-Schadenstoleranz reguliert über die Ubiquitinierung von PCNA die Rekrutierung potentiell mutagener Transläsionspolymerasen oder Aktivierung eines fehlerfreien Matrizenwechsels im Falle von replikationsassoziierten DNA-Schäden. Wir konnten in der ersten Förderperiode zeigen, dass PCNA- Ubiquitinierung über die E3-Ligase der Monoubiquitinierung, Rad18, an der somatischen Hypermutation beteiligt ist. Zudem haben wir Interaktionspartner von Rad18 identifiziert und die Rolle des E2-Enzyms der Polyubiquititinierung, Ubc13, in der Immunglobulindiversifizierung untersucht. Im zweiten Projektteil konnten wir zeigen, dass Rad18 über seine Interaktionen, nicht aber über die PCNA-Ubiquitinierung, auch die DNA-Schadensabhängige Aktivierung des JNK-Signalwegs reguliert. Zudem fanden wir, dass die Funktion der E3-Ligase SHPRH bei der PCNA-Polyubiquitinierung redundant ist, SHPRH aber auch eine Rolle bei der Regulation der Doppelstrangbruchreparatur spielt. Aufgrund von Berichten zur Regulation der PCNA-Ubiquitinierung über Checkpoint-Signalwege haben wir die Rolle von p53 bei der Regulation der PCNA-Ubiquitinierung und Transläsionssynthese reevaluiert und auch in Bezug auf die Immunglobulindiversifizierung untersucht, sowie in Kooperation mit einem anderen DFG-Projekt die Rolle von Chk1 und 2 bei der Ig-Diversifizierung analysiert. Schlussendlich haben wir ein interessantes Mausmodell zur Untersuchung von Rad18-Funktionen genutzt, in dem wir eine stark restringierte Expression von Rad18 zeigen konnten. In neuronalen Vorläuferzellen des embryonalen Gehirns beeinflusst Rad18 die Zellproliferation positiv, während es in aktivierten B-Zellen einen negativen Einfluss auf die Proliferation zu haben scheint. Zudem ist Rad18 wichtig für die Aufrechterhaltung von B-Zellfunktionen im Alter. Die mechanistischen Grundlagen dieser Befunde werden in weiterführenden Untersuchungen analysiert.
Publications
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Davari K, Frankenberger S, Schmidt A, Tomi NS, Jungnickel B
(See online at https://dx.doi.org/10.4161/15384101.2014.964112)
