Entwicklung eines Mausmodells zur Erforschung der Rolle des Insulin-ähnlichen Wachstumsfaktors EPIL in der Migration invasiver Mammakarzinomzellen unter Zuhilfenahme von molekularen in vivo Bildgebungsverfahren
Final Report Abstract
Im diesem Projekt wurde die Rolle des Insulin-ähnlichen Wachstumsfaktors EPIL („early placenta insulin like") bei der Invasion und Metastasierung von Brustkrebs durch Etablierung eines Mausmodells untersucht. Zu diesem Zweck wurde das EPIL-Gen in einer humanen Mammakarzinomzellinie (SKBR3) unter Kontrolle eines dauerhaft aktiven Promotors überexprimiert. Die Zellen wurden gleichzeitig durch die Reportergene für a) Firefly-Luciferase (fLuc) und b) „green fluorescent protein" (GFP) markiert, um sie a) in vivo in der Maus lokalisieren und b) im Gewebe identifizieren zu können. Derartig modifizierte Zellen wurden zur Simulation unterschiedlicher Progressionsphasen an verschiedenen Stellen in Maeuse injiziert, um Invasion und Metastasierungsverhalten in Abhängigkeit von der Stärke der EPIL-Expression zu untersuchen. Mit Hilfe von in vivo Bildgebungs-Verfahren wurde dieses sowohl global als auch lokal in Gewebeschnitten erfasst. Als Modifikation und Erweiterung des urspruenglichen Projekts wurde ein komplexes Humanisierungsmodell venwendet, bei dem humanes Brustepithelgewebe in Brustfettgewebe von NOD-SCID Maeusen implantiert wird. Mit Hilfe dieser Methode sollte zum einen einen ein verbessertes Xenotransplantationsmodell fuer HER2 positive Mammakarzinomzellen etabliert werden und zum anderen die Rolle von EPIL in der Kommunikation zwischen Tumorzellen und dem umliegenden gesunden Epithel untersucht werden. Zu diesem Zweck sollten neben histologischen und immunhistochemischen Untersuchungen Expressionsanalysen durchgefuehrt werden. Auf diesem Wege sollten Genprodukten identifiziert werden, die durch Rueckkopplungstimulation der Tumorzellen nach parakriner Reizung von Stromazellen durch tumorproduziertes EPIL im Tumor reguliert werden.
Publications
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