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Zellanalyse- und Hochgeschwindigkeits-Sortiersystem

Subject Area Medicine
Term Funded in 2011
Project identifier Deutsche Forschungsgemeinschaft (DFG) - Project number 202602754
 
Final Report Year 2015

Final Report Abstract

Das Zellanalyse- und Hochgeschwindigkeits-Sortiersystem wurde am 15.09.2011 installiert. Es wird/wurde überwiegend von IPEK und der Abt. für Klinische Pharmakologie zur Auftrennung folgender Partikel genutzt:  Murine Leukozytensubsets (CD4+, CD11b+, pDC, B-cells, NK-cells) aus Blut, Knochenmark, Milz, Lymphknoten, Aorta, Lunge, Leber und Tumor  Murine hämatopoietische Stammzellen (LSK, GMP) aus Knochenmark  Humane Leukozytensubsets (CD4+, CD14/CD16, PMNs) und deciduale Stromazellen  Verschieden transfizierte (GFP+, RFP+, YFP+) Zellen und Zelllinien  In vitro kultivierte Zellen und Zelllinien: Endothelzellen, HaCaT, HEK, CHO, murine DC  Apoptotische Mikrovesikel aus Fibroblasten und HUVEC. Die gesorteten Zellen werden/wurden hpts. für folgende Assays gebraucht:  Isolation von Protein, mRNA oder genomischer DNA  In vitro Zellkultur und funktionelle Untersuchungen  Transferversuche in vivoMikroskopische Untersuchungen (Sorten auf Objektträger)  Klonale Expansion (Einzelzellablage auf 96-well plate). Innerhalb IPEK wurden vor allem Projekte bearbeitet, welche die differentielle Beteiligung einzelner Leukozytenpopulationen an der Pathogenese der Atherosklerose und die Rolle ihrer Sekretionsprodukte bei der Plaqueprogression detailliert untersucht haben. Dendritische Zellen, polymorphonukleäre Leukozyten (PMNs) und Mastzellen zusammen mit Monozyten/Makrophagensubsets und T-Zellen standen bei diesen Untersuchungen ausdrücklich im Vordergrund. Im Einzelnen wurden die Genese humaner Monozytensubsets und ihr spezifisches microRNA Profil ermittelt. In experimentellen Modellen der Athersoklerose wurde weiterhin die Subset-spezifische, Chemokin(rezeptor) gesteuerte Rekrutierung untersucht. Die Rolle von PMNs in Atherosklerose sowie Auslöser der pDC-vermittelten Plaqueprogression konnte ebenso nachgewiesen werden. Weiterhin wurde die Rolle der CD40 Signalkaskade in Subpopulationen dendritischer (mDC versus pDC) sowie T-Zellen (CD4+CD25+CD127- und CD4+CD25- CD127+) näher untersucht. Die Projekte aus der Abt. für Klinische Pharmakologie beschäftigen sich zum größten Teil mit Krebsimmuntherapie. Hier werden z.B. CD4+ Subsets, myeloide Supressorzellen, NK-Zellen, Makrophagen und mDC gesortet.

Publications

  • Autoantigenic protein-DNA complexes stimulate plasmacytoid dendritic cells to promote atherosclerosis. Circulation. 2012;125:1673-83
    Döring Y, Manthey HD, Drechsler M, Lievens D, Megens RT, Soehnlein O, Busch M, Manca M, Koenen RR, Pelisek J, Daemen MJ, Lutgens E, Zenke M, Binder CJ, Weber C, Zernecke A
  • Hematopoietic interferon regulatory factor 8-deficiency accelerates atherosclerosis in mice. ATVB. 2012;32:1613-23
    Döring Y, Soehnlein O, Drechsler M, Shagdarsuren E, Chaudhari SM, Meiler S, Hartwig H, Hristov M, Koenen RR, Hieronymus T, Zenke M, Weber C, Zernecke A
  • microRNA expression signatures and parallels between monocyte subsets and atherosclerotic plaque in humans. Thromb Haemost. 2012;107:619-25
    Bidzhekov K, Gan L, Denecke B, Rostalsky A, Hristov M, Koeppel TA, Zernecke A, Weber C
  • Distinct functions of chemokine receptor axes in the atherogenic mobilization and recruitment of classical monocytes. EMBO Mol Med. 2013;5:471-81
    Soehnlein O, Drechsler M, Döring Y, Lievens D, Hartwig H, Kemmerich K, Ortega-Gómez A, Mandl M, Vijayan S, Projahn D, Garlichs CD, Koenen RR, Hristov M, Lutgens E, Zernecke A, Weber C
  • Characterization of the CD14++CD16+ monocyte population in human bone marrow. PLoS One. 2014;9:e112140
    Mandl M, Schmitz S, Weber C, Hristov M
    (See online at https://doi.org/10.1371/journal.pone.0112140)
  • Evaluation of the BDCA2-DTR transgenic mouse model in chronic and acute inflammation. PLoS ONE 10(8): e0134176, 2015
    Mandl M, Drechsler M, Jansen Y, Neideck C, Noels H, Faussner A, Soehnlein O, Weber C, Döring Y
    (See online at https://doi.org/10.1371/journal.pone.0134176)
 
 

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