Expression des Gangliosids SSEA-4 als Marker für Klonogenität und invasive und metastatische Eigenschaften von Ewing-Sarkom-Zellen
Zusammenfassung der Projektergebnisse
Das Ziel des Projekts war die funktionelle Bedeutung des Gangliosid Antigen SSEA-4 (stage-specific embryonic antigen-4) in Ewing Sakom, einem aggressiven Knochentumor im Kindes-und Jugendalter, zu untersuchen. Wir fanden SSEA-4-Expression in niedriger (3 von 14), mittlerer (8 von 14) und hoher Dichte (4 von 14) auf der Zelloberfläche aller analysierten EwS-Zelllinien und in primären EwS-Tumorbiopsien (68 %, 21 von 31) unabhängig von molekularen und klinischen Krankheitsparametern. Die Oberflächenexpression von SSEA-4 wurde während der in vitro Kultivierung nicht beeinflusst. Die funktionelle Eigenschaft von SSEA-4 wurde in acht verschiedenen EwS Zelllinien untersucht. In in vitro Studien zeigte sich, dass SSEA-4high sortierten Zellen verglichen mit SSEA-4low sortierten Zellen eine signifikant höhere Proliferation, eine gesteigerte koloniebildende Kapazität, eine verminderte Empfindlichkeit gegenüber Doxorubicin sowie eine stärkere Migration aufweisen. SSEA-4low sortierten Zellen erlangten eine stärkere SSEA-4 Expression während der in vitro Kultivierung und in Xenograft-Tumoren. Die SSEA-4high Expression in EwS-Zellen war weder mit dem Expressionsniveau des EWSR1-FLI1-Fusionstranskripts oder seiner direkten Zielmoleküle noch mit Markern der epithelial-mesenchymale Transition (EMT) assoziiert. SSEA-4 spezifische CAR-T-Zellen interagierten spezifisch mit SSEA-4 positiven EwS-Zellen und bewirkten in vitro eine effektive Tumorzelllyse. Daher könnte das CAR-Targeting von SSEA-4 eine attraktive Strategie zur Eliminierung von EwS-Zellen sein und bedarf weitere Untersuchung für eine klinische Anwendung.
