Detektion und Kinetik von enzymkatalysierten Reaktionen einzelner Moleküle

• Applicant: Dr. Volker Uhl
• Subject Area: Biophysics
• Term: from 1998 to 2003
• Project identifier: Deutsche Forschungsgemeinschaft (DFG) - Project number 5097938

Im Vorantrag wurden zwei Techniken zur Beobachtung von UmsatzZeit Kurven von Reaktionen einiger weniger Enzymmoleküle entwickelt. Das "Mikroinjektionsverfahren" ist genügend empfindlich, um eine durch ein einzelnes LDH Molekül katalysierte Reaktion zu studieren, jedoch nur unter teilweise exotischen Bedingungen (hohe Viskosität). Das "Femtotropfen-Fusionsverfahren" läßt mehr Freiheitsgrade physikalisch-chemischer Bedingungen zu, benötigt aber derzeit noch 10-100 Enzymmoleküle. Vor allem dieses Verfahren soll so weiterentwickelt werden, daß der Übergang zu einer echten Enzelmolekül-Enzymkinetik mit breiter Variation der Reaktionsbedingungen möglich wird. Dies soll an mehreren Enzymen mit unterschiedlichen Struktureigenschaften durchgeführt werden. Um zu prüfen, ob diese Grundlagenuntersuchungen eine Applikationsperspektive haben, soll eine aus der klinischen Chemie bekannte Methode zur spezifischen LDH-Bestimmung an das "Femtotropfen-Fusionsverfahren" angepaßt und Untersuchungen an Blutserum durchgeführt werden.

• DFG Programme: Research Grants
• Participating Person: Professor Dr. Karl Otto Greulich