Untersuchungen katalytischer und regulatorischer Mechanismen beim Pyruvat-Dehydrogenase-Komplex

• Antragsteller: Professor Dr. Gerhard Hübner
• Fachliche Zuordnung: Biochemie
• Förderung: Förderung von 1992 bis 2002
• Projektkennung: Deutsche Forschungsgemeinschaft (DFG) - Projektnummer 5183668

Hauptziel der abschließenden Arbeiten zur Untersuchung katalytischer und regulatorischer Mechanismen beim Pyruvatdehydrogenase-Komplex ist die Aufklärung des durch Phosphorylierung/Dephosphorylierung ausgelösten Regulationsmechanismus des SäugerPyruvatdehydrogenase-Komplexes. Da die Phosphorylierung an der decarboxylierenden Komponente erfolgt, ist die Detektion einzelner an dieser Komponente ablaufender Reaktionsschritte notwendig. Für die Detektion des initialen Reaktionsschrittes, der Aktivierung des Cofaktors Thiamindiphosphat, steht eine Messtechnik zur Verfügung (Hübner et al., Science 275, 67-70), ebenso für die Folgeschritte der Addition des Substrates an das C2 des Cofaktors und die Decarboxylierung des Lactyl-Thiamindiphosphates. Durch Untersuchungen zum Einfluß der Phosphorylierung der decarboxylierenden Komponente auf diese elementaren Schritte im Katalysemechanismus, die durch Untersuchungen an verschiedenen Serinmutanten ergänzt werden, soll der molekulare Mechanismus der Regulation des Säuger-Pyruvatdehydrogenase-Komplexes aufgeklärt werden.

• DFG-Verfahren: Sachbeihilfen