Untersuchung der Biogenese von b-Typ Cytochromen photosynthetischer Membranen

• Applicant: Dr. Ute Boronowsky
• Subject Area: Plant Sciences
• Term: from 1999 to 2002
• Project identifier: Deutsche Forschungsgemeinschaft (DFG) - Project number 5212956

Ziel des Projektes ist es, zu verstehen, wie Proteine und ihre Kofaktoren eine funktionelle Anordnung in der Thylakoidmembran erreichen. Der Schwerpunkt liegt dabei auf der Untereinheit Cytb6 des Cytochrom b6f-Komplexes. Es handelt sich hierbei um ein integrales Membranprotein, das zwei bis-histidyl-ligierte Hämgruppen (bL und bH) bindet. Der Komplex ist für den gewählten Organismus Chlamydomonas reinhardtii nicht essentiell, was die Anwendung klassischer genetischer und biochemischer Methoden für die Untersuchung seiner Assemblierung erlaubt. Ortsgerichtete Mutagenese der vier als Liganden fungierenden Histidine ermöglichte die Differenzierung zwischen bL und bH defizienten Cyt b6-Proteinen und damit die Charakterisierung von b6fDefektmutanten. Genetische und biochemische Analysen weisen darauf hin, daß diese Stämme vier Loci (CCB1-4) tragen und daß alle vier Proteine den Einbau von bH katalysieren. Wichtigstes Ziel des Projektes ist es, die korrespondierenden Gene zu klonieren, um ihnen durch Sequenzanalyse Funktionen zuordnen zu können. Anschließend soll die subzelluläre Lokalisierung und biochemische Charakterisierung der Genprodukte und die gerichtete Mutagenese konservierter Aminosäuren in den klonierten Ccb-Genen begonnen werden.

• DFG Programme: Research Fellowships
• International Connection: USA
• Cooperation Partner: Professorin Dr. Sabeeha Merchant