Molekulare Charakterisierung und funktionelle Bedeutung der zellzyklus-spezifischen Phosphorylierung des Lamin assoziierten Polypeptids (LAP) 2

• Applicant: Dr. Andreas Paul Gajewski
• Subject Area: Basic Research in Biology and Medicine
• Term: from 1999 to 2002
• Project identifier: Deutsche Forschungsgemeinschaft (DFG) - Project number 5216610

Das Lamina-assoziierte Polypeptid 2a (LAP2a) scheint Bestandteil der Kernmatrix zu sein und eine wichtige Funktion bei der Kernstrukturierung im Verlauf des Zellzyklus zu besitzen. Erste Untersuchungen im Labor von Dr. Roland Foisner haben gezeigt, daß Verteilung und Interaktion von LAP2a höchstwahrscheinlich durch Phosphorylierung reguliert werden. Die äußerst wichtige biochemische Charakterisierung einer möglichen Phosphorylierung von LAP2a auf struktureller und funktioneller Ebene ist jedoch bis jetzt noch nicht erfolgt und soll daher im Verlauf des eingereichten Projektes durchgeführt werden. In einem ersten Schritt ist geplant, zellzyklusspezifische Phosphorylierungsstellen im LAP2a und die an der Phosphorylierung beteiligten Kinasen zu identifizieren. In einem zweiten Schritt sollen die identifizierten Phosphorylierungsstellen mutiert werden, so daß sie entweder nicht mehr phosphoryliert werden können oder eine ständige Phosphorylierung vorgetäuscht wird. Im dritten Schritt soll mit diesen Mutanten die funktionelle Bedeutung der Phosphorylierung im Hinblick auf Chromosomenbindung und Interaktion mit anderen Bindungspartnern im Verlauf des Zellzyklus untersucht werden. Der Einfluß der Mutanten auf die Kernbildung soll in vitro in Extrakten von Säugetieren und von Xenopus Eiextrakten getestet werden. Ferner soll durch Expression der Mutanten in Zellen ihr Einfluß auf den Verlauf der Zellteilung und die Kernstrukturierung in vivo untersucht werden.

• DFG Programme: Research Fellowships