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Charakterisierung von Interaktionspartnern der Collapsin-Response-Mediator-Proteine

Subject Area Molecular Biology and Physiology of Neurons and Glial Cells
Term from 2000 to 2003
Project identifier Deutsche Forschungsgemeinschaft (DFG) - Project number 5264998
 
(Wortlaut des Antrags) Die Collapsin Response Mediator Proteine (CRMPs) bilden eine Familie cytosolischer Proteine, die als Signaltransduktionsproteine beim Versuch der Expressionsklonierung von Collapsin-Rezeptoren identifiziert wurden. CRMPs wurden u.a. als Marker differenzierender zentraler Neurone beschrieben, die nach Nervenläsionen re-exprimiert werden. Bisher ist unbekannt, mit welchen vorgeschalteten Proteinen der Zellmembran die CRMPs in Beziehung treten. Deshalb wollen wir am Modell der Großhirnrinde die molekularen Interaktionen membran-assoziierter CRMPs biochemisch untersuchen. Dazu sollen präzipitierende spezifische Antikörper gegen alle bekannten CRMPs hergestellt und CRMP-enthaltende Rezeptorkomplexe durch Ko-Präzipitationsexperimente charakterisiert werden. Interaktionsproteine sollen aus dem Gehirn neugeborener Ratten gereinigt, die cDNAs dieser Proteine kloniert und sequenziert werden. Durch Ko-Expression Epitop-markierter Proteine mit nachfolgender Immunkopräzipitationen, soll der Interaktionsmodus mit CRMPs geklärt werden. Die funktionelle Relevanz solcher Interaktionen wollen wir durch Wachstumskegel-Kollaps-Test untersuchen. Die Expression der CRMPs und ihrer Interaktionspartner soll immuncytochemisch während der Entwicklung des Gehirns und an verschiedenen zentralnervösen Läsionsmodellen untersucht werden.
DFG Programme Priority Programmes
 
 

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