Entwicklung eines Systems zur molekularen Evolution von Proteinen

• Applicant: Dr. Mathias Grün
• Subject Area: Biophysics
• Term: from 2000 to 2003
• Project identifier: Deutsche Forschungsgemeinschaft (DFG) - Project number 5267456

Aufgrund der kürzlich etablierten molekularbiologischen Technik des DNA shuffling und initialer Anwendungen scheint es erstmals möglich, durch gezielte Evolution Proteine mit völlig neuen Eigenschaften herzustellen. Durch Kombination von DNA shuffling mit ortsspezifischer Mutagenese soll im Rahmen dieses Projektes eine Bibliothek von Varianten eines ausgewählten Modellproteins (homing Endonuklease) erzeugt werden. Diese enthält Mutanten mit einer hohen Mutageneserate des aktiven Zentrums, aber mit einer geringen Mutageneserate im übrigen Protein. Die Bibliothek wird einem speziellen Verfahren unterworfen, das neben veränderter Spezifität (positive Selektion) explizit gegen unerwünschte Spezifität (negative Selektion) selektiert. Solche evolvierten homing Endonukleasen können aufgrund ihrer hohen Substratspezifität als völlig neue Werkzeuge in Molekularbiologie und Medizin dienen. Das dabei zu entwickelnde System ist, entsprechend modifiziert, auch auf andere Klassen von Proteinen anwendbar.

• DFG Programme: Emmy Noether International Fellowships