Golgi-spezifische Proteinkinase C-Bindungsproteine und -Substrate und ihre Bedeutung für die Bildung konstitutiver Transportvesikel

• Applicant: Dr. Peter Westermann
• Subject Area: Basic Research in Biology and Medicine
• Term: from 1996 to 2002
• Project identifier: Deutsche Forschungsgemeinschaft (DFG) - Project number 5280688

PKC reguliert die Biogenese konstitutiver Transportvesikel am TGN. Zur Untersuchung der Wirkungsweise wurden ein PKC-Bindungsprotein am Golgi aus HepG2-Zellen und mehrere PKC-Substrate, u.a. Profilin I und MARCKS-related protein, identifiziert. Die Bedeutung dieser Proteine für die Vesikelbildung wird mit Hilfe spezifischer Antikörper untersucht, wobei zunächst die intrazelluläre Lokalisation in HepG2-Zellen, die Bindung der Proteine an konstitutve Transportvesikel und der Effekt einer Proteindepletion auf die Vesikelbildung am TGN in vitro studiert werden. Bei den Proteinen, die entweder für die Vesikelbildung notwendig sind und/oder in Vesikel integriert werden, soll die Funktion in vivo nachgewiesen werden. Dazu wird die in vivo Phosphorylierung bei wachsenden und ruhenden Zellen, sowie der Einfluß einer verringerten Proteinexpression - durch die Anwendung von antisense-Oligonukleotiden bzw. die Mikroinjektion von Antikörpern - auf den zellulären Transport von Sekretproteinen untersucht. Das Ziel der Studie ist es, den Einfluß der Bindung der PKC an den Golgi und den der Phosphorylierung bestimmter Golgi-assoziierter Proteine auf die Regulation einzelner konstitutiver Transportwege nachzuweisen.

• DFG Programme: Research Grants