Änderungen des Intermembranabstandes während SNARE-vermittelter Membranfusion: Messungen an planaren Membranen mit fluoreszenzmikroskopischen Methoden

• Applicant: Dr. Volker Kießling
• Subject Area: Biophysics
• Term: from 2000 to 2002
• Project identifier: Deutsche Forschungsgemeinschaft (DFG) - Project number 5284310

Die Fusion von Vesikeln mit einer Zielmembran stellt einen komplexen Vorgang dar, der in regulierter Weise in Eukaryontenzellen abläuft. Die Membranfusion wird durch Fusionsproteine organisiert und reguliert. Wesentlicher Bestandteil sind dabei die sogenannten SNARE-Proteine, die sowohl in der Vesikel- als auch in der Zielmembran vorkommen.Die Mechanismen der SNARE-vermittelten Membranfusion sollen an einem künstlichen System aus Lipidvesikeln und planaren gestützten Membranen ("supported bilayer") untersucht werden. Dazu müssen SNAREs in geeignete Lipidmembranen integriert werden. Das Andocken und Fusionieren von Vesikeln an eine planare Membran soll mit fluoreszenzmikroskopischen Methoden studiert werden. Insbesondere sollen Abstandsänderungen zwischen den beteiligten Membranen mittels TIRFM ("total internal reflection fluorescence microscopy") und FLIC ("fluorescence interference contrast microscopy") detektiert werden. Die Funktion von weiteren am Fusionsprozess beteiligten Proteine kann durch selektive Zugabe untersucht werden. In weiteren Experimenten an diesem System können Konformations- und Lageänderungen der Proteine mit Hilfe von ATR-FTIR ("attenuated total reflection - Fourier-transform infrared") - Spektroskopie während des Fusionsablaufes detektiert werden.

• DFG Programme: Research Fellowships