Struktur/Funktionsbeziehungen nicht-mitochondrialer Nukleotidtransporter

• Applicant: Professor Dr. Ekkehard Neuhaus
• Subject Area: Plant Biochemistry and Biophysics
• Term: from 2000 to 2003
• Project identifier: Deutsche Forschungsgemeinschaft (DFG) - Project number 5304972

Plastiden und einige zelluläre Bakterien besitzen Nukleotidtransporter, die kaum strukturelle Ähnlichkeit zum mitochondrialen ADP/ATP-Carrier aufweisen. Die funktionelle Bedeutung konservierter Aminosäurereste des plasitidären ATP/ADP-Transporters aus Arabidopsis thaliana (AATP1, At) soll überprüft werden. Zur Ermittlung wichtiger biochemischer Kenngrößen, wie etwa der Effekt von pH- oder Ladungsgradienten auf den Transportvorgang, werden die nicht mitochondrialen Nukleotidtransporter heterolog exprimiert, anschließend angereichert und in Proteoliposome rekonstruiert. Das Bakterium Chlamydia trachomatis besitzt zwei mit dem plastidären ATP/ADP-Transporter eng verwandte Nukleotidtransporter (NPT1 und NPT2). NPT1 arbeitet als ATP/ADP-Antiporter, NPT2 kataylsiert einen netto Nukleotidimport. Das Nukleotidbindungszentrum von NPT1(Ct) soll mittels kovalenter Kopplung von 32P-8-Azido-ATP identifiziert werden. Wir werden chimäre Konstrukte von NPT1 und NPT2 herstellen, um zu ermitteln, welche Domänen in den beiden Proteinen für die unterschiedlichen Transporteigenschaften verantwortlich sind.

• DFG Programme: Research Grants