Molekulare und biochemische Charakterisierung der Alginat-Polymerase aus Pseudomonas aeruginosa
Final Report Abstract
Im Rahmen des Forschungsprojektes wurden isogene "Knock-out"-Mutanten bezüglich der Gene, die für die putativen Alginat-Polymerase-Untereinheiten Alg8, Alg44 und AlgX codieren, gewonnen. Die entsprechenden Mutanten waren nicht in der Lage Alginat zu bilden und konnten durch das jeweilige Gen zur Alginat-Produktion komplementiert werden. Dies Ergebnisse zeigten, dass alle drei Gene essentiell für die Alginat-Biosynthese sind. Ein in vitro Alginat-Polymerase-Assay wurde entwickelt und zeigte, daß die Alginat-Polymerase vermutlich aus Proteinuntereinheiten zusammengesetzt ist, die sich in der inneren (CM) und äußeren Membran (OM) befinden. Die Proteine Alg8, Alg44 und AlgX wurden subzellulär lokalisiert und als Proteine dargestellt, AlgS befindet sich als vermutlich katalytische Untereinheit in der CM, während Alg44 als Membranfusionsprotein vorwiegend im Periplasma mit vermutlich Anker in der CM vorlag. AlgX ist ein periplasmatisches Protein, welches eine spezifische Interaktion mit der Serinprotease MucD zeigt.
Publications
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