Untersuchungen zur Regulation der am Chlorophyll-Abbauweg beteiligten Enzyme

• Applicant: Professor Dr. Bernhard Grimm
• Subject Area: Plant Physiology
• Term: from 2005 to 2008
• Project identifier: Deutsche Forschungsgemeinschaft (DFG) - Project number 5456693

Ziele des Vorhabens sind die Aufklärung des regulatorischen Enzymschrittes im Chlorophyllabbau und die Identifizierung von neuen Proteine, die mit am Chlorophyllabbau beteiligten Enzymen interagieren. Regulation der Phaeophorbid-a-Oxygenase (PaO) oder der Roten-Chlorophyllkatabolit-Reduktase (RCCR) bestimmt am wahrscheinlichsten die Geschwindigkeit des Chlorophyllabbaus. Zum Nachweis des den Chlorophyllabbau stimulierenden Enzyms, sollen mittels eines alkoholinduzierbaren Promotorsystems (AlcR/AlcA) RCCR, PaO oder beide Enzyme gleichzeitig (ermöglicht durch Expression mit einer internen Ribosomen-Eintrittssequenz [IRES]) in transgenen Pflanzen überproduziert werden, die den genetischen Hintergrund der Arabidopsis-Wildtyp-Pflanzen oder der entsprechenden Mutante für je einen der beiden Enzymschritte haben. In diesen transgenen Linien werden auch Analysen der Genexpression ausgewählter Gene des Chlorophyllstoffwechsels und der antioxidativen Abwehr sowie der Chlorophyllintermediate und von Antioxidantien erfolgen. Außerdem sollen Interaktionspartner der beiden Enzyme durch die kürzlich auch für Arabidopsis beschriebene Tandem-Affinitäts-Reinigung (TAP) induziert werden. Enzymassays gaben Hinweise auf lösliche Faktoren, die die PaO/RCCR-Reaktion stimulieren.

• DFG Programme: Research Grants