Die Funktionen von Amigo2 und Cd44 in der Entwicklung von B-Zell-vermittelten Immunantworten

• Antragstellerin: Dr. Lesly Calderon
• Fachliche Zuordnung: Immunologie
• Förderung: Förderung seit 2026
• Projektkennung: Deutsche Forschungsgemeinschaft (DFG) - Projektnummer 570624963

B-Zell-Antworten sind essenziell für die humorale Immunität gegen Krankheitserreger, da sie zur Bildung von antikörperproduzierenden Zellen führen, welche große Mengen an antigenspezifischen Antikörpern sezernieren, um die Infektion zu beseitigen. -Zell-Antworten führen zur Entstehung langlebiger Gedächtnis-B-Zellen und auch antikörperproduzierende Zellen haben das Potenzial, in einen langlebigen Zustand überzugehen. Beide Zelltypen sind essentiell für das immunologische Gedächtnis gegen Krankheitserreger. Um neue Regulatoren der Entwicklung antikörperproduzierender Zellen im Kontext des Milz-Mikromilieus zu identifizieren, haben wir ein in vivo Modellsystem für gepoolte sgRNA CRISPR/Cas9-Screens bei Mäusen, die mit Modellantigenen immunisiert wurden, etabliert. Mit diesem in vivo System haben wir mehrere neuartige positive und negative Regulatoren der B-Zell-Aktivierung, der Differenzierung antikörperproduzierender Zellen und der Homöostase identifiziert, die in vorherigen in vitro Screens nicht identifiziert wurden. Zwei bemerkenswerte Regulatoren sind die Adhäsionsmoleküle Amigo2 (positiver) und Cd44 (negativer Regulator). Unser Projekt zielt darauf ab, die Funktionen von Amigo2 und Cd44 in der Entwicklung von B-Zell-vermittelten Immunantworten zu untersuchen. Mit neuartigen experimentellen Ansätzen sowie in vitro und in vivo Mausmodellen werden wir die molekularen Mechanismen erforschen, die der Funktion von Amigo2 und Cd44 zugrunde liegen. Die Forschung wird mit den folgenden Zielen durchgeführt: 1. Die Auswirkungen der Amigo2- und Cd44-Genlöschung auf die Bildung und Homöostase antikörperproduzierender Zellen zu bestimmen. 2. Die Prozesse und Signalwege zu bestimmen, die von Amigo2 und Cd44 reguliert werden und für die Entwicklung von B-Zell-Antworten wichtig sind. Teil 1 dieses Vorschlags bewertet die Defekte in Amigo2- und Cd44-defizienten B-Zellen in vivo im Ruhezustand oder nach Antigenimmunisierung. Zusammen mit in vitro B-Zell-Aktivierungsassays sollen diese Experimente die Phasen der B-Zell-Antwort identifizieren, die durch die Inaktivierung von Amigo2 and Cd44 vorranging beeinflusst werden könnten. Teil 2 des Vorschlags beschreibt transkriptomische, proteomische und phosphoproteomische Experimente, mit denen Signalwege untersucht werden, die in Amigo2- und Cd44-defizienten B-Zellen während der Aktivierung und Differenzierung in antikörperproduzierende Zellen betroffen sind. Unsere Forschung wird neue Einblicke in die molekularen Mechanismen bieten, die die B-Zell-Aktivierung und Differenzierung in Effektorzellen regulieren. Darüber hinaus könnten bisher unbekannte molekulare Wege aufgedeckt werden, die B-Zell-vermittelte Immunantworten steuern. Diese neuartigen Wege könnten Möglichkeiten für therapeutische Interventionen bieten, um die Immunität gegen Krankheitserreger zu stärken oder die B-Zell-Funktion unter verschiedenen Bedingungen, wie Autoimmunerkrankungen, Allergien und B-Zell-Malignitäten, zu kontrollieren.

• DFG-Verfahren: Sachbeihilfen