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Structural genome annotation and quantification of transcripts based on ultra-high-throughput transcriptome sequencing

Subject Area Bioinformatics and Theoretical Biology
Term from 2010 to 2014
Project identifier Deutsche Forschungsgemeinschaft (DFG) - Project number 179180132
 
Final Report Year 2015

Final Report Abstract

Von den ursprünglich geplanten beiden Teilprojekten - Identifikation und Quantifizierung von Transkripten - wurde bis auf die Anwendung der Vorarbeiten zur Quantifizierung nur das Teilprojekt der Identifikation von Transkripten mit RNA-Seq durchgeführt. Das Genvorhersageprogramm AUGUSTUS wurde für die Integration von RNA-Seq-Reads, die mit modernen Alignmentprogrammen gegen das Genom aligniert werden, angepasst. Um die Annotation von Genomen für einzelne Arbeitsgruppen technisch zu erleichtern, wurde ein Webservice zum Training von und für die genomweite Vorhersage mit AUGUSTUS eingerichtet, der serverseitig eine automatisierte Pipeline aufruft. Ein unabhängiger Vergleich von RNA-Seq-basierten Genomannotationsmethoden hat ergeben, dass AUGUSTUS zu den genauesten Programmen gehört. Es werden deutlich mehr Gene richtig identifiziert als ohne die Verwendung von RNA-Seq. Allerdings verbleiben auch bei Verwendung der momentan genauesten Methoden zur RNA-Seq-basierten Annotation proteinkodierender Gene in eukaryotischen Genomen viele Fehler - in komplexen Genomen wurde bei ca. 40% der Gene keines der Isoformen fehlerfrei identifiziert. Die Methoden wurden in mehreren Genomannotationsprojekten, darunter die Honigbiene, Chlamydomo-nas reinhardtii, der Tabak Nicotiana attenuata, die Spinne Parasteatoda tepidariorum und der Käfer Tribolium castaneum, von uns angewendet. Darüber hinaus wird AUGUSTUS häufig und zunehmend von anderen Wissenschaftlern zur Genomannotation eingesetzt.

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