Reifung, Aktivität und Struktur der Cystein Peptidase Tan aus Drosophila
Zusammenfassung der Projektergebnisse
Der erhoffte Fortschritt zum Verständnis der Funktion von Tan im Histamin Recycling Prozess konnte erreicht werden. Die Kinetik der Aktivitätssteigerung des Enzyms zeigte zwei völlig unterschiedliche Verläufe für Carcinin und β-Alanyl-Dopamin Hydrolyse. Mit zunehmender Konzentration von Carcinin steigt die Reaktionsgeschwindigkeit langsam über einen weiten Bereich an. Das wurde von uns als Regulationsphänomen interpretiert. Mit dieser Kinetik wird der Kreislauf von Histamin erst bei Erreichen eines gewissen Konzentrationsniveaus aktiviert und bei Erhöhung der Konzentration entsprechend verstärkt. β-Alanyl-Dopamin hingegen wird bei Erreichen einer bestimmten Konzentration praktisch in einer Alles oder Nichts Reaktion mit maximaler Geschwindigkeit hydrolysiert. Die Hintergründe für die oftensichtlich andere Kinetik in der Kutikula werden diskutiert. Eine Kristallisierung und Strukturanalyse konnte nicht erreicht werden. Die methodischen Schwierigkeiten hatten schon bei dem nahe venwandten lAT Enzym zu langjährigen Versuchen der Kristallisierung geführt. Deshalb kann es nicht verwundern, dass ein entsprechendes Vorhaben mit Tan nicht auf Anhieb zum Erfolg geführt hat. Untersuchungen des Tan Proteins in meinem Labor sind dennoch hiermit wie ich meine zum größten Teil erfolgreich abgeschlossen.
Projektbezogene Publikationen (Auswahl)
- (2007) Drosophila photoreceptors express cysteine peptidase Tan. J Comp Neurol. 500(4):601-11
Wagner, S., Heseding, C., Szlachta, K., True, J.R., Prinz, H., and Hovemann, B.T.
- A Glial Variant of the Vesicular Monoamine Transporter Is Required To Store Histamine in the Drosophila Visual System. PLoS Genet. 2008 Nov;4(11):e1000245. Epub 2008 Nov 7
Romero-Calderón, R., Uhlenbrock, G., Borycz, J., Simon, A.F., Grygoruk, A., Yee, S.K., Shyer, A., Ackerson, L.C., Maidment, N.T., Meinertzhagen, I.A., Hovemann, B.T., Krantz, D.E.
- Alternative tasks of Drosophila tan in neurotransmitter recycling vs cuticle sclerotization disclosed by kinetic properties. J. Biol. Chem. 2010 Jul 2;285(27):20740-7
S. Aust, F. Brüsselbach, S. Pütz, and B.T. Hovemann
