Durchflusszytometer
Zusammenfassung der Projektergebnisse
Der analytische 4-Laser-Durchflusszytometer wurde seit seiner Beschaffung in verschiedensten Forschungsprojekten eingesetzt, welche hier kurz zusammengefasst werden. Der analytische Durchflusszytometer wurde insbesondere für verschiedene Zelltodnachweismethoden, Zellzyklusprofile sowie zur Phänotypisierung von Immunzellen verwendet. Zudem wurde einige Analysen durchgeführt, welche die metabolische Funktionen in lebenden Zellen testen. Thiazolid-Induzierte Apoptose in colorektalen Tumorzellen: In diesem Projekt untersuchten wir die Wirkung und den Mechanismus einer neuartigen antimikrobiellen Substanzklasse, der sogenannten Thiazolide auf colorektale Tumorzellen. Wir konnten dabei aufzeigen, dass Thiazolide über einen Glutathion-S-tranferase und Bcl-2 Familie abhängigen Prozess Apoptose induziert. Der analytische Durchflusszytometer leistete uns dabei wertvolle Dienste im quantitativen und qualitativen Nachweis von Apoptose und Nekrose, der Untersuchung des Zellzyklus sowie dem Nachweis der zellulären Respiration. Synergistischer Zelltod durch TRAIL und Chemotherapie: In diesem Projekt untersuchten wir wie das TNF-Familienmitglied TRAIL in Synergie mit chemotherapeutischen Substanzen Apoptose induziert in hepatozellulären Tumorzellen. Dabei konnten wir herausfinden, dass TRAIL über einen Jun-Kinase abhängigen Mechanismus den mitochondrialen Bcl-2 abhängigen Apoptoseweg verstärkt. Der analytische Durchflusszytometer wurde dabei einerseits zum quantitativen und qualitativen Nachweis von Zelltod verwendet, andererseits zum Nachweis von mit fluoreszierenden Proteinen markierten Apoptoseregulatoren. TNF-induzierter Zelltod im Darmepithel: In diesem Projekt untersuchten wir warum das Darmepithel so empfindlich reagiert auf das Zytokin TNF. Wir konnten dabei herausfinden, dass TNF-assoziierte Ubiquitin- Ligase cIAP1 dabei eine kritische rolle spielt. cIAP1 ist nur minimal exprimiert im Darmepithel und eine Deletion oder pharmakologische Inhibition führt zu einer massiven Sensibilisierung gegenüber der Apoptose-induzierenden Wirkung von TNF. Der analytische Durchflusszytometer wurde hauptsächlich zum quantitativen und qualitativen Nachweis von Zelltod verwendet. Die Rolle von LRH-1 in T Zellen: In diesem Projekt haben wir die Rolle des nukleären Rezeptors und Transkriptionsfaktors LRH-1 in T Lymphozyten untersucht. Diese Studie konnte zum ersten mal aufzeigen, dass LRH-1 in der T Zelllinie exprimiert ist und dort eine wichtige Rolle spielt in der T Zellentwicklung durch die Regulation der T Zellproliferation. Dabei haben gefunden, dass eine Deletion von LRH-1 in T Zellen zu einer starken Reduktion der Anzahl von peripheren T Zellen führt und zu einer Unfähigkeit auf Immunstimulation zu reagieren. Das Gerät wurde in dieser Studie extensiv zum quantitativen und qualitativen Nachweis von Zelltod, Proliferation und vor allem zur Phänotypisierung von Immunzellen verwendet.
Projektbezogene Publikationen (Auswahl)
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Thiazolide-induced apoptosis in colorectal cancer cells is mediated via the Jun kinase-Bim axis. Oncogene. 2012 Sep 13;31(37):4095-106
Sidler D et. al.
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Ex vivo culture of intestinal crypt organoids as a model system for assessing cell death induction in intestinal epithelial cells and enteropathy. Cell Death Dis. 2014 May 15;5:e1228
Grabinger T. et al.
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Expanding the scope of human DNA polymerase lamda and beta inhibitors. ACS Chem Biol. 2014 Jan 17;9(1):282-90
Strittmatter T et al.
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Structure-Function relationship of thiazolide-induced apoptosis in colrectal tumor cells. ACS Chem Biol. 2014 Jul 18;9(7):1520-7
Brockmann A et. al.
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Thiazolide promote apoptosis in colorectal tumor cells via MAP kinase-induced Bim and Puma activation. Cell Death Dis. 2015 Jun 4;6:e1778. 2015
Brockmann A. et al.
