Durchflusszytometer
Final Report Abstract
Der analytische 4-Laser-Durchflusszytometer wurde seit seiner Beschaffung in verschiedensten Forschungsprojekten eingesetzt, welche hier kurz zusammengefasst werden. Der analytische Durchflusszytometer wurde insbesondere für verschiedene Zelltodnachweismethoden, Zellzyklusprofile sowie zur Phänotypisierung von Immunzellen verwendet. Zudem wurde einige Analysen durchgeführt, welche die metabolische Funktionen in lebenden Zellen testen. Thiazolid-Induzierte Apoptose in colorektalen Tumorzellen: In diesem Projekt untersuchten wir die Wirkung und den Mechanismus einer neuartigen antimikrobiellen Substanzklasse, der sogenannten Thiazolide auf colorektale Tumorzellen. Wir konnten dabei aufzeigen, dass Thiazolide über einen Glutathion-S-tranferase und Bcl-2 Familie abhängigen Prozess Apoptose induziert. Der analytische Durchflusszytometer leistete uns dabei wertvolle Dienste im quantitativen und qualitativen Nachweis von Apoptose und Nekrose, der Untersuchung des Zellzyklus sowie dem Nachweis der zellulären Respiration. Synergistischer Zelltod durch TRAIL und Chemotherapie: In diesem Projekt untersuchten wir wie das TNF-Familienmitglied TRAIL in Synergie mit chemotherapeutischen Substanzen Apoptose induziert in hepatozellulären Tumorzellen. Dabei konnten wir herausfinden, dass TRAIL über einen Jun-Kinase abhängigen Mechanismus den mitochondrialen Bcl-2 abhängigen Apoptoseweg verstärkt. Der analytische Durchflusszytometer wurde dabei einerseits zum quantitativen und qualitativen Nachweis von Zelltod verwendet, andererseits zum Nachweis von mit fluoreszierenden Proteinen markierten Apoptoseregulatoren. TNF-induzierter Zelltod im Darmepithel: In diesem Projekt untersuchten wir warum das Darmepithel so empfindlich reagiert auf das Zytokin TNF. Wir konnten dabei herausfinden, dass TNF-assoziierte Ubiquitin- Ligase cIAP1 dabei eine kritische rolle spielt. cIAP1 ist nur minimal exprimiert im Darmepithel und eine Deletion oder pharmakologische Inhibition führt zu einer massiven Sensibilisierung gegenüber der Apoptose-induzierenden Wirkung von TNF. Der analytische Durchflusszytometer wurde hauptsächlich zum quantitativen und qualitativen Nachweis von Zelltod verwendet. Die Rolle von LRH-1 in T Zellen: In diesem Projekt haben wir die Rolle des nukleären Rezeptors und Transkriptionsfaktors LRH-1 in T Lymphozyten untersucht. Diese Studie konnte zum ersten mal aufzeigen, dass LRH-1 in der T Zelllinie exprimiert ist und dort eine wichtige Rolle spielt in der T Zellentwicklung durch die Regulation der T Zellproliferation. Dabei haben gefunden, dass eine Deletion von LRH-1 in T Zellen zu einer starken Reduktion der Anzahl von peripheren T Zellen führt und zu einer Unfähigkeit auf Immunstimulation zu reagieren. Das Gerät wurde in dieser Studie extensiv zum quantitativen und qualitativen Nachweis von Zelltod, Proliferation und vor allem zur Phänotypisierung von Immunzellen verwendet.
Publications
- Thiazolide-induced apoptosis in colorectal cancer cells is mediated via the Jun kinase-Bim axis. Oncogene. 2012 Sep 13;31(37):4095-106
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Strittmatter T et al.
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Brockmann A et. al.
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Brockmann A. et al.
(See online at https://doi.org/10.1038/cddis.2015.137)
