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Projekt
Z-Project: Analytische Verfahren zur Bestimmung des Schilddrüsenhormonstatus in biologischen Proben aus Projekten des SPP 1629
Antragsteller
Professor Dr. Josef Köhrle
Fachliche Zuordnung
Endokrinologie, Diabetologie, Metabolismus
Förderung
Förderung von 2012 bis 2019
Projektkennung
Deutsche Forschungsgemeinschaft (DFG) - Projektnummer 221224269
Schilddrüsenhormone (TH) und ihre Metabolite (THM) z.B. Thyronamine (THM, Thyroessigsäuren (TA) und verschiedene konjugierte Formen zirkulieren im Blut in freier oder proteingebundener Form. In der ersten SPP Förderperiode optimierten und validierten wir zwei neue Immunoassays (IA) für 3,5-T2 und 3T1AM im humanen Serum und wendeten sie in Kooperation mit anderen SPP Partnern für erste Analysen klinischer Proben an. Auch eine auf liquid-liquid Extraktion (LLE)-basierte Liquid Chromatography-Tandem Mass Spectrometry (LC-MS/MS) Methode für die Messung von THM Profilen in Zellkultur Überständen wurde voll validiert und weiterentwickelt für die Messung in Zell- und Mausgewebeextrakten unter Einsatz eines modifizierten präanalytischen Verfahrens mit solid phase extraction (SPE). Die Optimierung und Validierung der LC-MS/MS Methoden einschliesslich der präanalytischen Probenaufbereitung für humanes und Mausserum sind in Bearbeitung. Verschiedene Matrixeffekte führen zu Ionensuppression in der MS und beeinträchtigen die Recovery und Prozesseffizienz. Radioimmunoassays (RIA) für die rT3 Bestimmung in humanem Serum sowie die T4 und T3 Messung in Mausserum wurden erfolgreich zur Datenerhebung gemeinsam mit SPP Partnern eingesetzt. Während der zweiten Förderperiode werden im Z-Projekt des SPP die folgenden Ziele angestrebt: (1) Anwendung des 3T1AM IA zur Bestimmung alters-und geschlechtsspezifischer Referenzbereiche für 3T1AM im menschlichen Serum bei Kindern und Erwachsenen,(2) Charakterisierung entwicklungs-, geschlechts-, alters- und krankheitsspezifischer THM Profile in humanen Serum für die (personalisierte) Diagnostik und Verlaufskontrolle therapeutischer Interventionen, (3) Abschluss der Validierung der Methode der THM LC-MS/MS Analytik für humane und Mausseren nach Erreichen der Qualitätskontrollparameter, die von Fachgremien für klinische Labordiagnostik gefordert werden, (4) Optimierung der präanalytischen TAM Extraktion aus serumhaltigen Matrices. Das Z-Project als zentrale Plattform stellt validierte IA und MS-basierte Methoden für analytische Fragestellungen und quantitative Analyse von THM Profilen in klinischen und experimentellen biologischen Proben den SPP Partnern zur Verfügung.
DFG-Verfahren
Schwerpunktprogramme
