Konfokales Mikroskop
Final Report Abstract
Das Konfokale Mikroskop wurde Ende 2015 in der zentralen Serviceeinheit „Mehrdimensionale Mikroskopie und zelluläre Diagnostik“ installiert, im Februar 2016 in Betrieb genommen, und wird seitdem von verschiedenen Kooperationspartnern genutzt. Im Rahmen von Forschungsprojekten des SFB779 und des SFB854 diente das Gerät der Visualisierung neuronaler und immunologischer Zellen und Zellverbänden. Insbesondere wurden Biosensoren für Pathogenproliferation und Stress für die Erreger Leishmania major und Staphylococcus aureus sowohl in vitro also auch in vivo mit den Gerät grundcharakterisiert oder für Messungen in fixierten Geweben verwendet. Proteine der Src Familie, (Fyn, Lck) wurden bezüglich der subzellulären Lokalisation untersucht. Kolokalisationen phosphorylierter und nicht-phosphorylierter Proteine wurden dreidimensional analysiert. Dazu wurden neben Antikörperfärbungen verstärkt fluoreszierende Fusionskonstrukte eingesetzt um dynamische Veränderungen in lebenden Zellen verfolgen zu können. Mittels eines Calcium-Indikators konnten mithilfe des Resonanzscanners stimulusvermittelte Änderung der Calcium-Konzentrationen analysiert werden. Der UV Laser ermöglichte dabei ratiometrische Messung des Farbstoffes Indo1, unabhängig von der Beladung der Zellen; Klima-Kammer und Begasung mit 5% CO2 gewährleisteten standardisierte Messbedingungen. Diese Messungen auf Einzelzellbasis ermöglichten die Optimierung von Biosensoren. Subzelluläre Verteilungsvorgänge wurden außerdem mittels photoaktivierbarer/konvertierbarer fluoreszierender Proteine analysiert. Darüber hinaus wurden Nanopartikel-Beladungseffizienzen mittels konfokalem Reflexionskontrast in T Zellen untersucht.
Publications
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Frontline Science: Leishmania mexicana amastigotes can replicate within neutrophils. Journal of Leukocyte Biology, 102(5), 1187-1198.
Hurrell, Benjamin P.; Beaumann, Manon; Heyde, Sandrina; Regli, Ivo B.; Müller, Andreas J. & Tacchini-Cottier, Fabienne
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HIPP neurons in the dentate gyrus mediate the cholinergic modulation of background context memory salience. Nature Communications, 8(1).
Raza, Syed Ahsan; Albrecht, Anne; Çalışkan, Gürsel; Müller, Bettina; Demiray, Yunus Emre; Ludewig, Susann; Meis, Susanne; Faber, Nicolai; Hartig, Roland; Schraven, Burkhart; Lessmann, Volkmar; Schwegler, Herbert & Stork, Oliver
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CD11c-expressing Ly6C+CCR2+ monocytes constitute a reservoir for efficient Leishmania proliferation and cell-to-cell transmission. PLOS Pathogens, 14(10), e1007374.
Heyde, Sandrina; Philipsen, Lars; Formaglio, Pauline; Fu, Yan; Baars, Iris; Höbbel, Guido; Kleinholz, Corinna L.; Seiß, Elena A.; Stettin, Juliane; Gintschel, Patricia; Dudeck, Anne; Bousso, Philippe; Schraven, Burkhart & Müller, Andreas J.
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Longitudinal proliferation mapping in vivo reveals NADPH oxidase-mediated dampening of Staphylococcus aureus growth rates within neutrophils. Scientific Reports, 9(1).
Seiß, Elena A.; Krone, Anna; Formaglio, Pauline; Goldmann, Oliver; Engelmann, Susanne; Schraven, Burkhart; Medina, Eva & Müller, Andreas J.
