Funktionelle Rolle der intrazellulären Chlorid/Proton Austauscher ClC-3, ClC-4 und ClC-5 in der Neurosekretion

• Antragsteller: Dr. Raul E. Guzman Castro
• Fachliche Zuordnung: Molekulare Biologie und Physiologie von Nerven- und Gliazellen
• Förderung: Förderung von 2019 bis 2023
• Projektkennung: Deutsche Forschungsgemeinschaft (DFG) - Projektnummer 430631456

ClC-3, ClC-4, und ClC-5 sind Chlorid/Protonen Austauscher, die in endosomalen Kompartimenten vieler Zellen vorkommen. Ihr großer Einfluss auf die normale Zellfunktion wird durch den schweren Phänotyp von Clcn3-/- Mäusen und Erkrankungen, die mit Mutationen der CLCN4 und CLCN5 Gene assoziiert sind, deutlich. Wie diese Transporter solche zellulären Disfunktionen verhindern und in welchen zellulären Funktionen sie eine Rolle spielen, ist jedoch noch weitgehend unbekannt. Unser Ziel ist die Untersuchung der Funktion von ClC-3, ClC-4 und ClC-5 in Neurosekretion in Chromaffine Zellen der Nebenniere. Wir werden die Rolle des Cl-/H+ Austauschers bei der Katecholamine-akkumulation und Sekretion in Chromaffinen Zellen mithilfe von hochauflösender Kapazitätsmessungen, Blitzlicht Photolyse von caged Ca2+ und Amperometrie analysieren. Für diese Untersuchungen wird die ClC-3, ClC-4, und ClC-5 Expression und Funktion mittels verschiedener genetisch veränderter Mausmodelle modifiziert, denen entweder ClC-3 und/oder ClC-4, in Kombination mit einem ClC-5 knock-down, fehlen, oder ClC-3 mit modifizierter Funktion (Clcn3E281Q/E281Q), oder ausschließlich bestimmte ClC-3 Splice Varianten exprimieren. Es wird erwartet, dass diese Experimente neuen Aufschluss über die Rolle dieser Splice Varianten geben, sowie über den Einfluss von heterodimeren Zusammenschlüssen und die Hauptfunktion von ClC-3, ClC-4, und ClC-5 für Akkumulation von Katecholamin und Freisetzung von LDCV liefern werden

• DFG-Verfahren: Sachbeihilfen