Funktionale und strukturelle Charakterisierung der humanen SLC20 Proteine: PiT1 und 2

• Antragstellerin: Dr. Charlott Stock
• Fachliche Zuordnung: Strukturbiologie ; Biochemie
• Förderung: Förderung von 2021 bis 2023
• Projektkennung: Deutsche Forschungsgemeinschaft (DFG) - Projektnummer 462647097

• Erstellungsjahr: 2023

Zusammenfassung der Projektergebnisse

Der Focus dieses Walter Benjamin Postdoc Stipendiums, welches in der Arbeitsgruppe von Prof Poul Nissen / Aarhus University durchgeführt wurde, waren SLC20A1/2 bzw. PiT1/2, zwei wenig charakterisierte eukaryotische Natrium-gekoppelte Phosphat-Transporter. Diese sind überall im Körper zu finden und wurde lange als basale Phosphat-Transporter beschrieben. Der embryonal-letale Phänotyp eines PiT1 KO in Mäusen und die Rolle von PiT1/2 in adaptiven und genetischen Kalzinosen hat diese Transporter in den Focus gerückt. Das Ziel dieses Forschungsvorhabens war es, das Verständnis des molekularen Mechanismus von PiT1/2, mittels funktionaler und struktureller Studien, voran zu treiben. Leider sind die generierten Ergebnisse sehr limitiert. Obwohl viele verschiedene Ansätze verfolgt wurden war es nicht möglich Protein in ausreichender Qualität und Quantität herzustellen. Um wissenschaftliche Weiterbindung zu ermöglichen wurde gegen Ende des Projektes ein weiteres Zielprotein hinzugefügt, welches den geplanten kurzen Aufenthalt im Labor von Markus Seeger / Zürich Universität und Training und Anwendung von Einzelmolekül-Analyse via Cryo-EM ermöglichte.

Projektbezogene Publikationen (Auswahl)

• Deciphering ion transport and ATPase coupling in the intersubunit tunnel of KdpFABC. Nature Communications, 12(1).
  Silberberg, Jakob M.; Corey, Robin A.; Hielkema, Lisa; Stock, Charlott; Stansfeld, Phillip J.; Paulino, Cristina & Hänelt, Inga
  
• Autoinhibition and regulation by phosphoinositides of ATP8B1, a human lipid flippase associated with intrahepatic cholestatic disorders. eLife, 11.
  Dieudonné, Thibaud; Herrera, Sara Abad; Laursen, Michelle Juknaviciute; Lejeune, Maylis; Stock, Charlott; Slimani, Kahina; Jaxel, Christine; Lyons, Joseph A.; Montigny, Cédric; Pomorski, Thomas Günther; Nissen, Poul & Lenoir, Guillaume
  
• Inhibited KdpFABC transitions into an E1 off-cycle state. eLife, 11.
  Silberberg, Jakob M.; Stock, Charlott; Hielkema, Lisa; Corey, Robin A.; Rheinberger, Jan; Wunnicke, Dorith; Dubach, Victor RA; Stansfeld, Phillip J.; Hänelt, Inga & Paulino, Cristina
  
• eGFP as an All-in-One Tag for Purification of Membrane Proteins. Methods in Molecular Biology, 171-186. Springer US.
  Heger, Tomáš; Stock, Charlott; Laursen, Michelle Juknaviciute; Habeck, Michael; Dieudonné, Thibaud & Nissen, Poul