Die Rolle des nicht-kanonischen NF-kB Signalweges in intrahepatischen Cholangiokarzinomen

• Antragsteller: Privatdozent Dr. Bruno Christian Köhler
• Fachliche Zuordnung: Gastroenterologie
• Förderung: Förderung seit 2022
• Projektkennung: Deutsche Forschungsgemeinschaft (DFG) - Projektnummer 469903177

Das beantragte Projekt untersucht die Rolle des nicht-kanonischen Nuclear Factor kappa B (NF-кB) Signalweges in intrahepatischen Cholangiokarzinomen (iCCA). Die Inzidenz des iCCA ist weltweit zunehmend, weshalb ein tiefergehendes molekulares Verständnis des iCCA dringend erforderlich ist.Der NF-кB Signalweg besteht aus einem komplexen Netzwerk von Proteinen und ist in einen kanonischen und einen nicht-kanonischen Pfad aufgeteilt. Im Gegensatz zum kanonischen ist die Rolle des nicht-kanonischen Signalweges in der Leber, speziell den Cholangiozyten, wenig untersucht. Unsere Studien zeigen eine Aktivierung des nicht-kanonischen NF-кB Signalweges im biliären Epithel in humanen chronischen Lebererkrankungen. Experimente in Mäusen zeigen, dass RELB als Transkriptionsfaktor des nicht-kanonischen Signalweges biliäre Fibrose und duktuläre Reaktionen verursacht. Unsere Daten zeigen zudem die Bedeutung von Lymphotoxin beta (LTB) als aktivierenden Ligand des nicht-kanonischen NF-кB Signalweges im Gallengangsepithel. Die Aktivierung von RELB in murinen und humanen iCCA konnten wir belegen. Basierend darauf wird im beantragten Projekt der mechanistische Einfluss des nicht-kanonischen NF-кB Signalweges im iCCA untersucht. Eine umfassende Plattform von in vitro, in vivo und ex vivo Strategien sowie multi-omic Daten wird hierbei genutzt. Cholangiozyten und CCA-Zelllinien werden auf Empfindlichkeit gegenüber einer Aktivierung oder Blockade des nicht-kanonischen NF-кB Signalweges analysiert. In Organoidkulturen von Gallengangsepithelien und iCCA wird die Funktion von RELB in einer isolierten, gewebeähnlichen Situation überprüft. Um das nicht-kanonischen NF-кB Netzwerk in einem komplexeren System zu evaluieren, werden RELB knockout Mäuse (AlbCre und CK19Cre) in iCCA Modellen untersucht. Ergänzend werden Kohorten von Vorläufer-Läsionen und CCA, die im Rahmen internationaler Kooperationen zugänglich sind, immunhistochemisch analysiert. Umfassende Analysen werden Protein-Interkationen und Schlüssel-Proteine des gesamten Signalweges identifizieren. ChIP-Sequencing ermöglicht es, die RELB Aktivierung auf transkriptioneller Ebene zu entschlüsseln.Die Rolle des nicht-kanonischen NF-кB Weges im Prozess der Metastasierung wird in einer Kohorte metastasierter CCA Fälle analysiert, für die RNA-, Ganzgenom-Sequenzierung und Gewebe zur Verfügung stehen. Das Ziel des Projektes ist die Aufklärung der funktionellen Rolle des nicht-kanonischen NF-кB Signalweges mit Fokus auf der Aktivierung von RELB im iCCA. Die umfassenden Analysen werden einen relevanten Beitrag für das Verständnis einer aggressiven Krebserkrankung leisten.

• DFG-Verfahren: Sachbeihilfen