Der tumorpräventive Effekt von polyIC und die Bedeutung der Toll-like Rezeptor- vermittelten Signaltransduktion für die Hepatokarzinogenese
Hämatologie, Onkologie
Zusammenfassung der Projektergebnisse
Diese Forschung, eine Zusammenarbeit zwischen der AG Calvisi an der Universität Regensburg und dem Feng-Laboratorium an der University of California San Diego, untersuchte die Rolle von CD133 in der interzellulären Signalübertragung. Die Hypothese war, dass unter einem Mangel an proliferativem Signal (SHP2-Deletion in der Mausleber) gefolgt von einem proproliferativen Reiz (partielle Leberresektion) regionale CD133-positive Zellcluster entstehen, die aktiv proliferieren. Diese Cluster waren nicht klonal, sondern stammten von verschiedenen benachbarten Hepatozyten. Single-Cell-RNA-Sequenzierung zeigte einen Austausch von Immediate Early Gene (IEG) Transkripten in den CD133-positiven Kolonien, was zu höherer intrazellulärer Diversität führte. Es wurde die Idee einer neuartigen CD133-abhängigen Art des IEG-Transports zwischen Zellen entwickelt. Ein bestimmter Antikörper zeigte einzigartige Partikel auf einem filamentartigen Muster zwischen Zellen, woraus die Hypothese von neuartigen Signalkörpern abgeleitet wurde, die den IEG-Transport vermitteln und als Erklärung für die Funktion von CD133 als Stammzellmarker dienen könnten. Die durchgeführte Forschung konzentrierte sich darauf, die Natur dieses Organells zu untersuchen. Ein Experiment mit CD133-GFP-überexprimierenden und mCherry-positiven Zellen zeigte den Partikeltransport zwischen benachbarten, klonal nicht verwandten Zellen. Korrelative Licht- und Elektronenmikroskopie bestätigten die Anwesenheit von CD133-GFP-positiven Partikeln im Zytoplasma benachbarter Zellen, ohne jedoch ihre genaue Natur zu klären. Techniken für Live-Cell-Imaging wurden mit dem Dog-Catcher Dog-Tag-System und dem ALFA-Tag ALFA-Nanobody-System entwickelt. Knock-Ins kleiner molekularer Tags in die CD133-Genomsequenz wurden mithilfe von CRISPR-Cas9 erstellt, da die Überexpression von CD133 nicht ausreichte, um die Dynamik unter physiologischen Bedingungen zu untersuchen. Massenspektrometrische Analysen an ALFA-Tag-Knock-Ins bestätigten neue Interaktionspartner von CD133, darunter Major Vault Protein (MVP) und Transmembranprotein 205 (TMEM205).
Projektbezogene Publikationen (Auswahl)
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Identification of CD133+ intercellsomes in intercellular communication to offset intracellular signal deficit. eLife, 12.
Kaneko, Kota; Liang, Yan; Liu, Qing; Zhang, Shuo; Scheiter, Alexander; Song, Dan & Feng, Gen-Sheng
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Complex Roles of PTPN11/SHP2 in Carcinogenesis and Prospect of Targeting SHP2 in Cancer Therapy. Annual Review of Cancer Biology, 8(1), 15-33.
Scheiter, Alexander; Lu, Li-Chun; Gao, Lilian H. & Feng, Gen-Sheng
