Konfokales Laserscanning-Mikroskop
Final Report Abstract
Charakterisierung von Implantatoberflächen mit konfokaler Laser-Scanning-Mikroskopie: Zur morphologischen Charakteriserung der Wirkstoffbeschichtung von Drug-Eluting Stents werden stichprobenartig an verteilten Messpunkten entlang der Stents 3D-Bilder der Oberfläche und der Polymer-Beschichtung sowie Tiefenprofile der Schichtdicke aufgenommen. Konfokale Mikroskopie ermöglicht hier neben der strukturellen Charakterisierung der Beschichtungsoberfläche auch die Abbildung der unter der transmittierenden Polymerschicht liegenden Oberfläche des Stentgrundgerüstes sowie die Bestimmung der Schichtdicke mit einer Auflösung in z Richtung deutlich unterhalb eines Mikrometers. Charakterisierung von Biomaterialien, biologischen Präparaten und lebenden Zellen mit konfokaler Fluoreszenzmikroskopie: Eine zelluläre Besiedlung nicht transparenter Oberflächen ist mikroskopisch nur durch die Laser-Scanning-Mikroskopie darzustellen. Mit dieser Methodik wurde untersucht, wie auf Oberflächen adhärierende Zellen vital oder fixiert dargestellt werden können. Endothelzellen (HUVEC) wurden auf Plättchen aus PHA1, PHA2 oder PLLA ausgesät. Als Negativkontrolle (NC) diente das Polystyrol der Mikrotiterplatte. Nach zwei Tagen wurden adhärente Zellen durch eine Vitalfärbung oder nach Fixierung gefärbt und mit der CLSM dargestellt. Adhärente, vitale Endothelzellen können mit dem Life/Dead-Assay sehr gut dargestellt werden. Adhärente Endothelzellen können alternativ auf dem Substrat fixiert und danach für die Mikroskopie gefärbt werden. Beide Verfahren eignen sich zur Darstellung adhärenter Zellen auf einem Substrat und zeigen vergleichbare Ergebnisse. Auf PHA1 erscheinen mehr fixierte Zellen als vitale Zellen. Die mikroskopische Bewertung der Reendothelialisierung von Stentoberflächen stellt ein unerlässliches Werkzeug bei der Weiterentwicklung von bioaktiven Oberflächen dar.
Publications
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