Die Beteiligung einer Halogenase und einer "Nicht-Häm-Haloperoxidase" an der Balhimycin-Biosynthese

• Antragsteller: Professor Dr. Karl-Heinz van Pée
• Fachliche Zuordnung: Mikrobiologie, Virologie und Immunologie
• Förderung: Förderung von 1999 bis 2006
• Projektkennung: Deutsche Forschungsgemeinschaft (DFG) - Projektnummer 5225014

Im Gencluster für die Balhimycin-Biosynthese wurden Gene für eine NADH-abhängige Halogenase und eine "Nicht-Häm-Haloperoxidase" gefunden. Durch Untersuchungen der Substratspezifität soll ein leicht zugängliches Substrat für die NADH-abhängige Halogenase gefunden und darauf aufbauend ein Reinigungsverfahren entwickelt und das Enzym bezüglich seiner molekularen und kinetischen Eigenschaften charakterisiert werden. Nach Subklonierung des "Haloperoxidase"-Gens und Überexpression soll die "Haloperoxidase" gereinigt und anschließend charakterisiert werden. Das gereinigte Enzym soll mit bereits bekannten "Nicht-Häm-Haloperoxidasen" verglichen werden. Durch Einbringen des "Haloperoxidase"-Gens aus Streptomyces aureofaciens oder S. lividans in eine Mutante des Balhimycin-Produzenten, die keine aktive "Haloperoxidase" mehr produziert, soll geprüft werden, ob diese die entsprechende Funktion übernehmen können. Mit Hilfe einer entsprechenden Deletionsmutante soll die Rolle der "Nicht-Häm-Haloperoxidase" in der Balhimycin-Biosynthese untersucht und aufgeklärt werden, welche Substrate von den Nicht-Häm-Haloperoxidasen akzeptiert werden; hierbei könnten entscheidende Hinweise auf die allgemeine biologische Funktion dieser Enzyme erhalten werden.

• DFG-Verfahren: Sachbeihilfen