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Bestimmung der Rolle von Merozoitenproteinen in Plasmodium falciparum durch "gene disruption" und künstlich kontrollierte Genexpression

Fachliche Zuordnung Parasitologie und Biologie der Erreger tropischer Infektionskrankheiten
Förderung Förderung von 2000 bis 2003
Projektkennung Deutsche Forschungsgemeinschaft (DFG) - Projektnummer 5225972
 
Die Merozoite Proteins von Plasmodium falciparum sind wahrscheinlich bei der Invasion des Parasiten in die Erythrozyten beteiligt und während des Übergangs von einer Wirtszelle zur anderen dem Immunsystem des Wirts ausgesetzt, wodurch ihnen eine wichtige Bedeutung während einer Malariainfektion zukommt. Die Identifikation der Rolle der an diesem Prozeß beteiligten Proteine wäre sowohl für ihre potentielle Verwendung als Vakzine als auch als Ziel für Medikamente von Bedeutung. Die Isolierung von "gene knock-outs" aus P. falciparum, die einen Wachstumsnachteil haben (wie MSP3), stellt sich als sehr schwierig dar. Daher wäre ein System, das dies ermöglichen würde, sehr hilfreich. Darüberhinaus sind viele Gene, die an der Invasion beteiligt sind, essentiell (wie MSP2). Für die Analyse ihrer Funktion wäre die Entwicklung eines induzierbaren Transkriptions- und Expressionssystems wichtig. Die Ziele des beantragten Projekts sind:1. Isolierung von "MSP3 knockout" Parasiten und die Bestimmung der Funktion des Proteins durch Analyse des Invasions-Phänotyps und der Proteine an der Merozoitenoberfläche. 2. Entwicklung eines Plasmidsystems, das mittels GFP die Detektion von seltenen Transfektanten mit der relevanten Mutation durch FACS Analyse und Klonierung ermöglicht. Verwendung dieses Systems, um "MSP Gen knock-outs" zu isolieren.3. Etablierung eines induzierbaren Tetracyclin-abhängigen Kontrollsystems in P. falciparum und Verwendung dieses Systems zur Kontrolle der Expression der MSP Gene, die sich nicht mit dem Plasmidsystem unterbrechen lassen.
DFG-Verfahren Forschungsstipendien
Internationaler Bezug Australien
Kooperationspartner Dr. Alan Cowman
 
 

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