Molekularbiologische und physiologische Charakterisierung des nukleären Auxinbindenden Proteins ABP44 in Pisum sativum L.

• Applicant: Dr. Thomas Reinard
• Subject Area: Plant Sciences
• Term: from 1999 to 2002
• Project identifier: Deutsche Forschungsgemeinschaft (DFG) - Project number 5260484

Im Verlauf der Vorarbeiten konnte ein Auxin-bindendes Protein (ABP44) isoliert, charakterisiert und aufgereinigt werden (Reinhard und Jacobsen, 1994, 1995). Im ersten Förderungszeitraum wurde der Schwerpunkt der Arbeiten auf die Optimierung der Aufreinigung und die weitere Charakterisierung der Auxinbindung gelegt (Reinard et al., 1998). Das Screening einer humanen scFv-Antikörper Bank führte zur Selektion von scFv's gegen das ABP44. Dazu wird in den nächsten Wochen ein eigener Antrag gestellt, der auch die Überexpression von ABP44 in Tabak, bzw. eine genetische Substraktion mittels AntisenseKonstrukt oder a-ABP44-scFv behandelt. Durch Mikrosequenzen und eine neu erstellte cDNA Bank wurde das abp44-Gen isoliert. Der vorliegende Antrag soll die molekularbiologischen Arbeiten durch Frau Dipl.Biol. Janke weiter ermöglichen. Die ermittelten Motive des abp44-Gens geben die Richtung an. Weiterhin sollen mittels Southern-Analysen die Anzahl der Genkopien sowie das Vorkommen des abp44-Gens in anderen Species untersucht werden. Parallel dazu soll auch das in E.coli exprimierte ABP44 für solche Analyen verwendet werden.

• DFG Programme: Priority Programmes
• Subproject of: SPP 1067: Molekulare Analyse der Phytohormonwirkung