Zellbiologische Charakterisierung von CGRP-Rezeptoren in der Haut

• Applicant: Dr. Dirk Roosterman
• Subject Area: Pediatric and Adolescent Medicine
• Term: from 2000 to 2002
• Project identifier: Deutsche Forschungsgemeinschaft (DFG) - Project number 5264624

(Wortlaut des Antrags)Das Ziel des Forschungsprojektes ist die Bestimmung der Mechanismen, die für die proinflammatorische Wirkung des calcitoningene-releated peptide (CGRP) verantwortlich sind. Die Arbeit ist gegliedert in: (a) die Untersuchung der Signaltransduktionswege und des Agonisten-vermittelten Transportes der CGRP Rezeptoren und (b) die Bestimmung der Lokalisierung der CGRP Rezeptoren in kutanen Gewebekulturen.Für die Untersuchungen der Signaltransduktionswege und des Agonisten-vermittelten Transportes sollen HEK 293 T-Zellen stabil mit Wildtyp bzw. mit Epitop-markierten CGRP Rezeptoren, RDC-1 bzw. CRLR und RAMP1, transfiziert werden. In den Zellinien soll die CGRP stimulierte Aktivierung der Adenylatzyklase und der MAP-Kinasen im RIA und im Western Blot ermittelt werden. Der zeitliche Verlauf des Agonisten-vermittelten Transportes der Epitop-markierten Rezeptoren soll im confokalen Mikroskop beobachtet und die subzelluläre Verteilung der Rezeptoren bestimmt werden. Polyklonale Antikörper sollen gegen RDC-1, CRLR und RAMP1 generiert werden, die in Kryoschnitten der humanen Dermis zur immunhistochemischen Bestimmung der Lokalisierung der Rezeptoren eingesetzt werden sollen.

• DFG Programme: Research Fellowships