Das Schlüsselenzym Sialinsäurenbiosynthese, die UDP-GlcNAc-2-Epimerase/ManNAc-Kinase - Strukturaufklärung und Charakterisierung der aktiven Zentren

• Antragsteller: Privatdozent Dr. Lothar Lucka
• Fachliche Zuordnung: Biochemie
• Förderung: Förderung von 2000 bis 2003
• Projektkennung: Deutsche Forschungsgemeinschaft (DFG) - Projektnummer 5284692

Sialinsäuren sind essentielle Bestanteile komplexer Glycanketten von Glycoproteinen und Glycolipiden. Sie sind an Adhäsionsprozessen beteiligt, mit der Entwicklung und Funktion von Organen verknüpft, regulieren den Abbau von Serumglycoproteinen und gealterten Erythrozyten und spielen eine Rolle bei Krankheitsbildern.Die UDP-N-Acetylglucosamin-2-Epimerase/N-Acetylmannosaminkinase ist das Schlüsselenzym der Sialinsäurebiosynthese. Es konnte in unserer Arbeitsgruppe als bifunktionelles Enzym charakterisiert werden. In dem geplanten Vorhaben soll seine dreidimensionale Struktur aufgeklärt werden. Dazu soll rekombinantes Enzym in ausreichender Menge exprimiert und anschließend kristallisiert werden. Die erhaltenen Kristalle sollen der Röntgenstrukturanalyse unterzogen werden. Um zu klären, inwieweit beide katalytischen Untereinheiten synergistisch oder unabhängig wirken können und welche Bereiche für die Oligomerisierung notwendig sind, sollen einzelne Domänen des Enzyms molekularbiologisch generiert, funktionell charakterisiert und ebenfalls ihre Struktur röntgenkristallographisch untersucht werden.

• DFG-Verfahren: Sachbeihilfen