Molekulare und funktionelle Charakterisierung von IRAG

• Antragsteller: Professor Dr. Jens Schlossmann
• Fachliche Zuordnung: Pharmakologie
• Förderung: Förderung von 2000 bis 2005
• Projektkennung: Deutsche Forschungsgemeinschaft (DFG) - Projektnummer 5286586

Die Kontraktilität des glatten Muskels wird u.a. durch die cGMP-abhängige Proteinkinase I (cGKI) reguliert. cGMP-abhängige Aktivierung dieses Enzyms führt zur Relaxation. Bei Untersuchungen der Zielproteine der cGKI konnten wir ein neues 125-135 kDa-Substratprotein der cGKI identifizieren. Dieses Protein bildet einen stabilen Signalkomplex mit der cGKIb und dem Inositoltrisphosphat Rezeptor (IP3R) und wird als IRAG (IP3R assoziiertes cGMP-Kinase Substrat) bezeichnet. Die IP3-induzierte Kalziumfreisetzung aus intrazellulären Speichern wird nach Phosphorylierung von IRAG durch cGKIb gehemmt. Wir wollen nun untersuchen, welche strukturellen Bereiche und welche Aminosäuren von IRAG für die Hemmung der IP3-vermittelten Kalziumfreisetzung entscheidend sind und wie die einzelnen Komponenten des cGK-Signalkomplexes miteinander interagieren. Außerdem wollen wir die Hemmung der intrazellulären Kalziumfreisetzung des IP3RI durch IRAG und cGKIb in frisch isolierten glatten Muskelzellen und evtl. Primärkulturen glatter Muskelzellen charakterisieren.

• DFG-Verfahren: Sachbeihilfen
• Großgeräte: Modernisierung des vorhandenen Fura2-Kalzium-Meßstandes: Komplettes 2-D-Fluoreszenz-Imaging-System
• Gerätegruppe: 5040 Spezielle Mikroskope (außer 500-503)