Molekulare Charakterisierung der Riechtransduktionskanäle aus Antennen von Flußkrebs und Hummer

• Applicant: Dr. Günter Gisselmann
• Subject Area: Biochemistry
• Term: from 1997 to 2000
• Project identifier: Deutsche Forschungsgemeinschaft (DFG) - Project number 5372555

Elektrophysiologisch konnte bei Crustaceen mittels der patch clamp Technik gesichert nachgewiesen werden, daß zwei Transduktionswege, die cAMP bzw. InsP3 als sec. Botenstoffe benutzen, in ein und derselben Riechsinneszelle vorkommen. Einzelkanalmessungen haben gezeigt, daß beim Hummer der durch IP3 geöffnete Kanal unspezifisch permeabel für Kationen ist, d.h. die Zelle depolarisiert (Erregung der Zelle). Der durch cAMP aktivierte Ionenkanal ist selektiv permeabel für K+, d.h. die Zelle wird hyperpolarisiert (Hemmung der Zellantwort).Ziel dieses Antrags ist es, die bisher unbekannten molekularen Strukturen dieser Kanäle aufzuklären. Im ersten Antragszeitraum wurden cDNA-Fragmente von Kandidaten für cAMP-gesteuerte Kanäle isoliert und sequenziert. Im weiteren Verlauf des Projekts sollen diese Versuche weitergeführt und die vollständige cDNAs der dieser Kanäle von Crustaceen komplettiert werden. Die Expression dieser Ionenkanäle soll durch eine in situ-Hybridisierung an kultivierten Riechzellen des Hummers nachgewiesen werden. Die cDNAs sollen rekombinant in Säugetierzellen (HEK293) oder Xenopus laevis Oocyten exprimiert werden. Mit Hilfe der patch clamp Methode können dann die biophysikalischen und pharmakologischen Eigenschaften der rekombinanten Kanäle bestimmt und mit denen der nativen Kanäle verglichen werden.

• DFG Programme: Priority Programmes
• Subproject of: SPP 1025: Molekulare Sinnesphysiologie
• Participating Person: Professor Dr. Hanns Hatt