Funktionelle Charakterisierung des Transkriptionsfaktors NFATc1 in Lymphozyten anhand von Mauslinien mit konditioneller NFATc1-Defizienz
Zusammenfassung der Projektergebnisse
NFAT (‚Nuclear Factor of Activated T Cell’)-Transkriptionsfaktoren spielen eine entscheidende Rolle bei der Kontrolle des „Über-Lebens“ von Lymphozyten und – wenn sie dereguliert sind – bei der Pathogenese von Lymphomen. Das trifft insbesondere für NFATc1/αA, die stark induzierbare kurze Isoform von NFATc1 zu, die in Lymphozyten durch T-Zell- bzw. B-Zell-Rezeptorsignale um das 10-20fache induziert wird. Experimentelle Daten unserer AG zeigten, dass sich NFATc1/αA deutlich von anderen NFAT-Proteinen unterscheidet, indem es offensichtlich anti-apoptotisch wirkt und zur Proliferation primärer Lymphozyten (und nicht zu deren Anergisierung) beiträgt. Zur detaillierten Charakterisierung von NFATc1/αA sowie weiterer NFATc1-Isoformen hatten wir die individuelle Deletion der beiden Promotoren P1 und P2 geplant, von denen P1 für die Induktion von NFATc1/αA – zusammen mit der gleichfalls induzierbaren proximalen poly A ‚site’ pA1 – verantwortlich ist. Durch die Kreierung von Nfatc1-P2flx/flx x cre-Mäusen mit entsprechenden „gefloxten“ Promotoren ist uns das für den P2-Promotor gelungen, während bei der Kreierung von Nfatc1-P1flx/flx – Mäusen durch den Verlust einer flox-‚site’ unerwartete Problem auftraten, die den Abschluss dieser Arbeiten bisher verzögerten. Gegenwärtig werden – in Zusammenarbeit mit den Laboren von Prof. A. Waisman und K. Reifenberg (Univ. Mainz) – neue Blastozysten-Injektionen unternommen, die solche Mäuse kreieren sollen. Parallel zu diesen experimentellen Arbeiten haben wir eine detaillierte Analyse von Mäusen durchgeführt, in denen das (gesamte) Nfatc1-Gen in Keimbahn-, Milz- bzw. Keimzentrums-B-Zellen deletiert wurde. Diese erbrachten neue Daten über die wichtige Rolle, die NFATc1 bei der Proliferation, dem ‚Activation Induced Cell Death’, dem IgG-Klassenwechsel von IgM zu IgG3 Antikörpern sowie bei der T-Zell-Hilfe durch B-Zellen spielt.
Projektbezogene Publikationen (Auswahl)
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Epigenetic changes and suppression of the NFATC1 promoter in human lymphomas with defects in immunoreceptor signalling. Am. J. Pathol. 172, 215-224 (2008)
Akimzhanov,A., Krenacs, L., Schlegel,T.,Klein-Hessling,S., Bagdi,E., Stelkovics,E., Kondo,E., Chuvpilo,S., Wilke, P., Avots, A., Gattenlöhner, S., Müller-Hermelink,H.-K., Palmetshofer,A., and Serfling, E.
