3-Laser Zellsortiergerät

• Fachliche Zuordnung: Grundlagen der Biologie und Medizin
• Förderung: Förderung in 2024
• Projektkennung: Deutsche Forschungsgemeinschaft (DFG) - Projektnummer 548361374

Die Durchflusszytometrie hat sich als Standardtechnologie für die Sortierung und Charakterisierung heterogener Mischungen biologischer Zellen etabliert. Dieser Antrag hat das Ziel eine Durchflusszytometer für die Analyse und Sortierung verschiedener biologischer Zellen zu erwerben. Das Durchflusszytometer wird für (i) die Trennung von induzierten pluripotenten und adulten Stammzellpopulationen, (ii) Zelltypen, die während der Stammzelldifferenzierung in Zelltypen wie Endothelzellen, exokrine Pankreaszellen oder Muskelzellen entstehen, (iii) das Sortieren von primärem menschlichen Patientenmaterial für Einzelzell-Omics-Analysen und (iv) das Sortieren von Hydrogel- oder Doppel-Emulsions-Tropfen, die mit Mikrosystemtechnologie-Plattformen erzeugt wurden, verwendet, ist aber nicht auf die genannten Beispiele beschränkt. Durchflusszytometer sind über die Core Facility Durchflusszytometrie der Universität Leipzig (UL) verfügbar. Die vorhandenen Instrumente wurden jedoch mit Schwerpunkt auf Mehrparameter-Sortierfähigkeiten erworben, um sehr heterogene Zellpopulationen zu charakterisieren. Für neue aufkommende Forschungsfelder und die Etablierung von Standardbetriebsverfahren für Zellkulturtechnologien werden einige Schlüsselparameter nicht erfüllt oder sind mit der vorhandenen Instrumentierung veraltet. Für die Etablierung von in-vitro Krankheitsmodellen oder Primärgewebe ermöglicht eine neue Generation von Durchflusszytometern das Sortieren fragiler Zelltypen mit deutlich höherer Vitalität dank schonender Zellsortierverfahren. Infolgedessen werden während des Sortierprozesses weniger Zellstressreaktionen induziert, was die Genauigkeit der nachgelagerten Analyse erhöht. Für Zellkulturen, die unter antibiotikafreien Bedingungen gehalten werden, ist ein steriler Sortierprozess entscheidend. Hier bieten geschlossene Systeme eine Lösung, da Kreuzkontaminationen vermieden werden. Weiterhin ermöglichen niedrige Zellverdünnungsfaktoren im Sortierprozess eine anschließende Sortierung mit geringem Probenverlust. Darüber hinaus wird unnötiger flüssiger Abfall minimiert, der im Hinblick auf GVO- und Krankheitsinfektionsregulierungen gehandhabt werden muss. Mit der Integration der angeforderten Durchflusszytometrie-Maschine in die Durchflusszytometrie-Kernfazilität der UL werden die bestehenden Anwendungen im Bereich Zellsortierung ergänzt und auf den neuesten Stand gebracht. Die neuere Durchflusszytometrie-Maschine, die wir planen zu kaufen, ist vereinfacht in ihrer Handhabung, kann leicht in Standardbetriebe integriert werden, bietet reduzierte persönliche Betriebszeit und verkürzt die Schulungszeiten für eine Vielzahl von Benutzern mit unterschiedlichen Forschungsanwendungen und -hintergründen. Zusammenfassend wird erwartet, dass der Erwerb der angeforderten Durchflusszytometers die Forschungsmöglichkeiten einer großen Benutzergruppe an der UL nachhaltig stärken wird.

• DFG-Verfahren: Forschungsgroßgeräte
• Großgeräte: 3-Laser Zellsortiergerät
• Gerätegruppe: 3500 Zellzähl- und Klassiergeräte (außer Blutanalyse), Koloniezähler
• Antragstellende Institution: Universität Leipzig
• Leiter: Professor Dr. Matthias Meier