Detailseite
Projekt
Isolierung menschlicher neutralisierender Antikörper gegen Adenovirus-Rezeptorbindungsdomänen
Antragsteller
Professor Dr. Thomas Krey
Fachliche Zuordnung
Virologie
Förderung
Förderung seit 2026
Projektkennung
Deutsche Forschungsgemeinschaft (DFG) - Projektnummer 548065690
Adenoviren (AdV) spielen eine doppelte Rolle für die menschliche Gesundheit, da sie sowohl als wichtige menschliche Krankheitserreger als auch als Werkzeuge für medizinische Intervention (z. B. Impfungen oder Gentherapie) fungieren. Für die adenoviralen Rezeptorbindungsproteine (d. h. die "fiber knob"-Domäne und die Penton-Base) existieren Strukturinformationen sowohl allein als auch im Komplex mit zellulären Rezeptoren. Im Gegensatz dazu ist über gegen das adenovirale Kapsid gerichtete menschliche Antikörper nicht viel bekannt, und bis heute gibt es keine Strukturdaten, die zeigen, wie Kapside von humanen Antikörpern erkannt werden. Es bleibt unklar, ob breit neutralisierende Antikörper als therapeutischer Ansatz zur Behandlung schwerer Adenovirus-Infektionen dienen könnten. Die drei wichtigsten Angriffspunkte für neutralisierende Antikörper sind das Hexon-Protein, die Penton-Base und die "fiber knob" Domäne. Antikörper, die auf die Penton-Base und die "fiber knob"-Domäne abzielen, neutralisieren wahrscheinlich mittels direkter Kompetition, während die Neutralisierung durch Hexon-gerichtete nAbs offenbar einen komplexeren Mechanismus nutzt. In diesem Projektantrag werden wir uns daher auf die Isolierung und Charakterisierung von humanen Antikörpern konzentrieren, die auf die "fiber knob"-Domäne und die Penton-Base abzielen. Wir werden zunächst rekombinante, mit einem Fluorophor fusionierte "fiber knob"-Domänen von AdVs herstellen, die für die Entwicklung von Impfstoffen oder die Gentherapie relevant sind (HAdV-C5, HAdV-D26 und ChAdOx-1), und diese verwenden, um antigenspezifische B-Gedächtniszellen aus mononukleären Zellen des peripheren Blutes gesunder Personen zu isolieren. Die Sequenzierung einzelner B-Zell-Rezeptoren (BCR) wird die Analyse des antigenspezifischen BCR-Repertoires ermöglichen und die rekombinante Herstellung von "fiber knob"-spezifischen menschlichen Antikörpern erlauben. Wir werden immunologische, biochemische und strukturelle Ansätze kombinieren, um ausgewählte Antikörper im Hinblick auf Neutralisierungspotenz, Affinität und Epitope zu charakterisieren. In einem zweiten Schritt werden wir rekombinante rezeptorbindende Domänen ("fiber knob"-Domänen und Penton-Base) von klinisch relevanten HAdVs wie HAdV-A31, HAdV-C2, HAdV-B55 und HAdV-F41 herstellen. Mit diesen Proteinen werden wir ein Serum-Screening durchführen und antigenspezifische Gedächtnis B Zellen von Personen mit hohen Serumtitern wie oben beschrieben identifizieren. Nach Sequenzanalyse werden wir rekombinante Antikörper exprimieren und ausgewählte Antikörper immunologisch, biochemisch und strukturell charakterisieren. Eine vergleichende Analyse der beiden BCR-Repertoires und die Charakterisierung einzelner Antikörper werden 1) wichtige Einblicke in das Zusammenspiel zwischen menschlichen Antikörpern und dem adenoviralen Kapsid, 2) neuartige Moleküle mit therapeutischem Potenzial und 3) wichtige Werkzeuge für die Adenovirusforschung liefern.
DFG-Verfahren
Forschungsgruppen
