Molekularbiologische Analyse viral-kodierter Mykotoxine in Hefen der Gattungen Zygosaccharomyces und Hanseniaspora und Charakterisierung ihrer dsRNA-Genome

• Antragsteller: Professor Dr. Manfred Josef Schmitt
• Fachliche Zuordnung: Mikrobielle Ökologie und Angewandte Mikrobiologie
• Förderung: Förderung von 2002 bis 2008
• Projektkennung: Deutsche Forschungsgemeinschaft (DFG) - Projektnummer 5382255

Im Unterschied zu den Killertoxinen der Bäckerhefe, die häufig nur nahe verwandte Arten abtöten, besitzen Killerstämme unter Nicht-Saccharomyceten ("non-conventional yeasts") ein breites Spektrum und wirken auf human- und pflanzenpathogene Hefen und Pilze gleichermaßen toxisch. Um unser Wissen über die Struktur, Funktion und Wirkung antimykotisch aktiver Killertoxine zu verbessern, soll im beantragten Projekt der Wirkmechanismus eines von der osmotoleranten Schadhefe Z. bailii sezernierten Virustoxins aufgeklärt werden. Das als Zygocin bezeichnete Proteintoxin wird in vivo von einem cytoplasmatischen Mykovirus kodiert, dessen dsRNA-Genom die Information zur Synthese einer unprozessierten Toxinvorstufe trägt. Um seine Toxizität zu charakterisieren, sollen Toxin-Interaktionspartner sowie Resistenz-vermittelnde Faktoren durch Transposon-Mutagenese identifiziert werden. Durch cDNA-Synthese sollen die Sequenzen von Zygocin und KT470, einem sekretorischen Virustoxin der Hefe H. uvarum, bestimmt werden, um zum einen das Modell der Toxinwirkung durch ortsgerichtete Mutagenese zu verifizieren und zum anderen, die Struktur-/Funktions-Beziehungen viraler Mykotoxine besser zu verstehen. Die heterologe Expression von Zygocin und seiner mutanten Varianten soll in der Spalthefe erfolgen, da diese Hefe die notwendige Fähigkeit besitzt, posttranslationale Präprotoxin-Modifikationen durchführen zu können.

• DFG-Verfahren: Sachbeihilfen