Expression des Thrombozytenrezeptors Glykoprotein Ib/IX und der von uns neu isolierten Gene in Tumor- und Endothelzellen
Zusammenfassung der Projektergebnisse
Wir haben die Septine SEPT4, SEPT5 und SEPTS kloniert und ihre Charakterisierung durchgeführt. Unsere InteraktionsStudien ergaben, daß SEPT8 mit SEPT5 interagieren; d.h. dies war die erste beschriebene humane Septin-Septin-Interaktion. Außerdem zeigten wir die Interaktion zwischen SEPT4 und SEPT8. Inzwischen wurden diese Ergebnisse von Martinez et al. bestätigt. Nachdem wir das jeweilige rekombinante Protein fur SEPT4, SEPT5 und SEPT8 hergestellt hatten, etablierten wir die entsprechenden polykonlalen Antikörper. Wir analysierten das Expressionsmuster fur SEPT4, SEPT5 und SEPT8 auf RNA- und auf Proteinebene. In Tumorzellen zeigen SEPT4 und SEPT5 ein unterschiedliches Expressionsmuster. Hingegen haben die beiden Septine SEPT5 und SEPT8 ein fast identisches Expressipnsmuster in normalem Gewebe und in Tumorzellen. Erstmals wiesen wir nach, dass außer SEPT5 auch die Septine SEPT4 und SEPT8 um die a- Granula in Thrombozyten lokalisiert sind und dass nach Aktivierung der Thrombozyten es zur Translokation der Septine zur Plasmamembran hin kommt wie dies für andere vesikelassozi ierte Proteine beschrieben ist. Interessanterweise identifizierten wir Snapin, ein SNARE- as soziiertes Protein, welches in die Exozytose involviert ist, als weiteren Interaktionspartner von SEPT8. Als weiteren Interaktionspartner von SEPT5 haben wir ein humanes Septin, welches bis zu diesem Zeitpunkt noch unbekannt war, ermittelt und nannten es SEPT1 1. Wir klonierten SEPT1 1 aus einer Endothelzellen-Genbank. Überraschend war, dass die Septine eine neue Proteinfamilie GTP-bindender Proteine bilden. Inzwischen sind 14 Septine kloniert, die an verschiedenen zellulären Prozessen (Zytokinese, Exozytose, intrazellulären Vesikeltransport und Signaltransduktion) beteiligt sind und in der Zelle ein eigenes Zyto Skelettsystem ausbilden. Die Septine SEPT5, SEPT6 und SEPT9 bilden als Fusionspartner des MLL-Gens Fusionsproteine, die bei bestimmten onkologischen Erkrankungen (z.B. Leukämie) gehäuft nachweisbar sind (Megonigal et al, 1998; Kim et al, 2000). SEPT9 wird in Mamma- Ca-Zellen erhöht exprimiert (Montagna et al, 2003). Die Detektion einer bestimmten S EPT4- Spleißvariante (sog. Bradeion) kann als Marker bei kolorektalen und urologischen Tumoren verwendet werden (Tanaka et al, 2003). Die Studien über Septine eröffnen somit ein neues Forschungsgebiet - und es wird sehr spannend sein zu analysieren, wie Septine diese zellulären Prozessen regulieren. Außerdem wird interessant sein, zu ermitteln, in wieweit Septine neurologische, onkologische und hämostaseologische Erkrankungen beeinflussen.
Projektbezogene Publikationen (Auswahl)
- Alternative expression of platelet glycoprotein Ibß mRNA from an adjacent 5'gene with an imperfect polyadenylation signal sequence. J Clin Invest 99:550-525, 1997
Zieger B, Hashimoto Y, Ware J
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Yagi M, Zieger B, Roth GJ, Ware J
- Characterization and expression analysis of two human septin genes, PNUTL1 and PNUTL2. Gene 261: 197-203, 2000
Zieger B, Tran H, Hainmann I, Wunderle D, Zgaga-Griesz A, Blaser S, Ware J
- Human septin-septin interaction: CDCrel-1 partners with KIAA0202. FEBS Letters 519:169-172,2002
Bläser S, Jersch K, Hainmann I, Wunderle D, Zgaga-Griesz A, Busse A, Zieger B
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Macara LG, Baldarelli R, Field CM, Glotzer M, Hayashi Y, Hsu S-C, Kennedy MB, Kinoshita M, Longtine M, Low C, Maltais LJ, McKenzie L, Mitchison J, Nisikawa T, Noda M, Petty E.M., Peifer M, Pringle JR, Robinson PJ, Roth D, Russell SEH, Stuhlmann H, Tanaka M, Tanaka T, Trimble WS, Ware J, Zeleznik-Le NJ, Zieger B
- Isolation of new splice isoforms, characterization and expression analysis of the human septin SEPTS (KIAA0202). GENE 312:313-320, 2003
Bläser S, Jersch K, Hainmarm I, Zieger W, Wunderle D, Busse A, Zieger B
- The novel human platelet septin SEPTS is an interaction partner of SEPT4. Thromb Haemost 91:959-966, 2004
Bläser S, Horn J, Würmell P, Bauer H, Strümpell S, Nurden P, Pagenstecher A, Busse A, Wunderle D, Hainmann I, Zieger B
- Immunoreactivity of the septins SEPT4, SEPT5, and SEPT8 in the human eye. Journal of Histochemistry and Cytochemistry, 1139-1147,2005
M. Pache, Zieger B., Bläser S., Meyer P.
- Human endothelial cell septins: SEPT11 is an interaction partner of SEPT5. J. Pathol 2006; 210(1):103-10
Bläser S, Röseler S, Rempp H, Bartsch I, Bauer H, Lieber M, Lessmann E, Weingarten L, Busse A, Huber M, Zieger B
- Septin expression in proliferative retinal membranes. J Histochem Cytochem. 55(11):1089- 94, 2007
Xin X, Pache M, Zieger B, Bartsch I, Prünte C, Flammer J, Meyer P
- The Septins and Platelets (Buchkapitel). The Septins (Buchtitel). Eds.Russell H, Hall PA, Pringle JR. John Wiley and Sons
Ware J, Martinez C and Zieger B
