Expression des Thrombozytenrezeptors Glykoprotein Ib/IX und der von uns neu isolierten Gene in Tumor- und Endothelzellen
Final Report Abstract
Wir haben die Septine SEPT4, SEPT5 und SEPTS kloniert und ihre Charakterisierung durchgeführt. Unsere InteraktionsStudien ergaben, daß SEPT8 mit SEPT5 interagieren; d.h. dies war die erste beschriebene humane Septin-Septin-Interaktion. Außerdem zeigten wir die Interaktion zwischen SEPT4 und SEPT8. Inzwischen wurden diese Ergebnisse von Martinez et al. bestätigt. Nachdem wir das jeweilige rekombinante Protein fur SEPT4, SEPT5 und SEPT8 hergestellt hatten, etablierten wir die entsprechenden polykonlalen Antikörper. Wir analysierten das Expressionsmuster fur SEPT4, SEPT5 und SEPT8 auf RNA- und auf Proteinebene. In Tumorzellen zeigen SEPT4 und SEPT5 ein unterschiedliches Expressionsmuster. Hingegen haben die beiden Septine SEPT5 und SEPT8 ein fast identisches Expressipnsmuster in normalem Gewebe und in Tumorzellen. Erstmals wiesen wir nach, dass außer SEPT5 auch die Septine SEPT4 und SEPT8 um die a- Granula in Thrombozyten lokalisiert sind und dass nach Aktivierung der Thrombozyten es zur Translokation der Septine zur Plasmamembran hin kommt wie dies für andere vesikelassozi ierte Proteine beschrieben ist. Interessanterweise identifizierten wir Snapin, ein SNARE- as soziiertes Protein, welches in die Exozytose involviert ist, als weiteren Interaktionspartner von SEPT8. Als weiteren Interaktionspartner von SEPT5 haben wir ein humanes Septin, welches bis zu diesem Zeitpunkt noch unbekannt war, ermittelt und nannten es SEPT1 1. Wir klonierten SEPT1 1 aus einer Endothelzellen-Genbank. Überraschend war, dass die Septine eine neue Proteinfamilie GTP-bindender Proteine bilden. Inzwischen sind 14 Septine kloniert, die an verschiedenen zellulären Prozessen (Zytokinese, Exozytose, intrazellulären Vesikeltransport und Signaltransduktion) beteiligt sind und in der Zelle ein eigenes Zyto Skelettsystem ausbilden. Die Septine SEPT5, SEPT6 und SEPT9 bilden als Fusionspartner des MLL-Gens Fusionsproteine, die bei bestimmten onkologischen Erkrankungen (z.B. Leukämie) gehäuft nachweisbar sind (Megonigal et al, 1998; Kim et al, 2000). SEPT9 wird in Mamma- Ca-Zellen erhöht exprimiert (Montagna et al, 2003). Die Detektion einer bestimmten S EPT4- Spleißvariante (sog. Bradeion) kann als Marker bei kolorektalen und urologischen Tumoren verwendet werden (Tanaka et al, 2003). Die Studien über Septine eröffnen somit ein neues Forschungsgebiet - und es wird sehr spannend sein zu analysieren, wie Septine diese zellulären Prozessen regulieren. Außerdem wird interessant sein, zu ermitteln, in wieweit Septine neurologische, onkologische und hämostaseologische Erkrankungen beeinflussen.
Publications
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